P物质融合毒素的质粒构建及其原核表达

• 作 者: 朱晓霞 张露萍 叶亚婷 严蓉蓉 代吕霞 曹康
• 机 构: 成都医学院检验系,成都医学院临床医学系,成都医学院临床技能中心,成都医学院病原生物学教研室,海洋石油总医院
• 出 处: 成都医学院学报
• 发表日期: 2018年1期
• 关键词: 原核表达 融合蛋白 大肠杆菌 质粒构建 Prokaryotic expressionFusion proteinEscherichia coliPlasmid
• 基金项目: 四川省教育厅科研项目(No:15ZB0250),大学生创新创业训练计划项目(No:CXJS201405,No:201513705026,No:201513705010),成都医学院校基金项目(No:CYCG15-02)

目的构建pET-CTR-PS重组原核表达质粒,原核表达Cholix Toxin的毒性部位和P物质的融合蛋白,为探讨该融合蛋白对肿瘤细胞的靶向杀伤作用奠定基础。方法 用PCR方法扩增Cholix Toxin的催化活性部分CTR,扩增后连入T载体构建T-CTR质粒。人工合成P物质双链寡核苷酸,将其插入pET32a中得到重组质粒pET-PS。将T-CTR和pET-PS分别经EcoRI和SacI双酶切后相接,构建得到重组质粒pET-CTR-PS。将测序正确的pET-CTR-PS重组质粒转化大肠杆菌BL21(DE3