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摘要 [目的]探究珠兰花叶斑线虫病的化学防治方法。[方法]采用阿维菌素的2种剂型（颗粒剂杀线通、乳油剂线灭）对歙县珠兰花叶斑线虫病进行化学防治试验，颗粒剂作用于土壤，乳油剂作用于叶片和叶芽。[结果]颗粒剂对珠兰花叶斑线虫病无防治效果；乳油剂能有效防治珠兰花叶斑线虫病，其最佳稀释倍数为600倍。[结论]研究结果为歙县珠兰花企业生产提供了参考。
关键词 珠兰花叶斑线虫病；颗粒剂；乳油剂；化学防治
中图分类号 S48 文献标识码 A 文章编号 0517-6611（2017）18-0120-03
Abstract [Objective] The aim was to explore chemical control methods for leaf spot nematode of pearl orchid. [Method] Two forms of avermectin like granular medicament and emulsifiable pesticide were used to control the diseases of pearl orchid caused by the leaf nematode. The granularmedicament acted on soil， while the other emulsion acted on leaf and leaf buds. [Result] The granular medicament was inoperative in the control of leaf spot nematode， which the emulsion was effective in prevention and treatment of nematode disease， and the screened optimum dilution ratio in our experiment was 600 times. [Conclusion] The results will provide reference for prevention and control of diseases of pearl orchid for local enterprise in Shexian.
Key words Pearl spot nematode disease；Granules；Emulsifiable concentrate；Chemical control
珠兰花茶窨制历史悠久，歙县三大花茶品类之一，是徽州特产[1]。但近年来歙县珠兰植株上经常感染一种叶斑线虫病，该病是珠兰花培育中发生较严重的病害，被群众称为“落叶鬼”，主要为害珠兰叶片，造成大量落葉，严重降低珠兰花的产量和质量[2]。农业防治、物理防治、生物防治对这类由线虫引发的病害并没有好的成效[3]，所以必须探索化学防治方法。阿维菌素是一种防治线虫的高效药剂，在环境中无累积作用，对作物较安全[4]，歙县推广该药剂进行叶斑线虫病的防治，但其剂型与浓度仍待探索。应当地企业要求，笔者运用颗粒剂（杀线通）和乳油剂（线灭）2种剂型的阿维菌素对珠兰花叶斑线虫病的化学防治进行了研究，确定了最佳的剂型与最适浓度，以期为珠兰叶斑线虫病的化学防治和歙县的珠兰花生产提供理论依据。
1 材料与方法
1.1 材料
供试的自然发病珠兰病株由安徽歙县珠兰花基地提供；试验中所用线虫从发病珠兰花的新鲜病叶中用贝尔曼漏斗法提取得到；线灭和杀线通2种剂型的阿维菌素均由黄山市歙县珠兰花基地提供。
1.2 方法
试验于2016年在黄山学院南校区进行。
1.2.1 药剂种类筛选。
试验选用3盆生长及发病情况较为一致的珠兰花病株并对其进行1～3号编号。1号植株施用线灭600倍稀释液；2号植株施用杀线通50 mg/株；3号植株为对照组施用清水。使用液体的线灭药剂时，用小型喷雾器将配制好的线灭600倍稀释液均匀地喷洒在珠兰病株上，使得枝条及叶正、背面呈现雾水状为佳；施用固体的杀线通之前，将珠兰土壤上的杂草除去，并平整盆中的土壤。用电子秤按要求称取所需质量的杀线通颗粒，撒在土壤表面使其均匀平整。施药后3、6、9、12 d觀察3盆珠兰花病叶的症状变化。
1.2.2 药剂浓度筛选。
选用乳油剂线灭，选取6盆病株进行试验，设置5个处理组和1个对照组。在相同的管理条件下，分别用线灭200倍、400倍、600倍、800倍、1 000倍稀释液喷洒处理，对照组喷清水处理。从每盆珠兰中选取40片叶子，于药后5、10、15 d观察统计其中感染叶斑线虫病的叶片数量，计算出病叶感染率，并取下5 g病叶用贝尔曼漏斗法提取线虫，在显微镜下观察统计5 mL提取液中线虫数量并比较。
2 结果与分析
2.1 施药后珠兰病株症状
施药后3、6、9、12 d进行观察，发现12 d内1号病株上叶片的病斑颜色变化缓慢，病斑感染面积基本无差异；2号与3号病株病斑颜色随时间的推移迅速从初始的淡黄色向黑褐色转变（图1）。
现有研究表明，线虫仅为害珠兰叶片，线虫侵入叶片后初期病斑呈淡黄色，微突起，病部因失绿，对光照略透明，雨后或保湿情况下病斑背面呈水渍状，后期病斑变成棕红色，病叶正面突起，背面凹陷，最后病斑呈黑褐色，病部组织坏死，由于病斑受叶脉限制而呈多角形。病斑由初期发展到后期（病斑呈黑褐色）大约需10 d，其发展到叶面1/3时叶片开始脱落[2]。
由图1可知，1号植株叶片上病斑感染面积的扩散速度与病斑颜色的变化速度和研究结果不同，2号植株和3号植株叶片病害症状变化较明显，病斑颜色快速向黑褐色转变，感染面积逐渐扩大直至脱落，与研究结果相符。这一现象可能与施用药剂进行防治有关。施用杀线通的2号植株与施用清水3号植株观察结果相近，说明杀线通对叶斑线虫病的防治无效。施用线灭药剂的1号植株与2号、3号植株相比，病斑的颜色变化与扩散速度较慢，说明线灭对防治珠兰叶斑线虫病有较好的效果。这可能与线灭为乳油剂，作用于珠兰叶芽与叶片，而杀线通为颗粒剂，作用于土壤有关。 1991年杨荣铮等[2]进行过珠兰叶斑线虫病初侵染来源和侵入途径的研究，取珠兰各部位和土壤分别进行分离，发现该线虫仅存在珠兰叶片和叶芽上，其他部位和土壤中没有线虫的存在。这一结果也从侧面证实了对土壤进行化学防治并没有意义和效果。因此，杀线通等作用于土壤的颗粒剂不适合珠兰叶斑线虫病的化学防治。线灭药剂虽对线虫的防治有较明显的效果，但仍需确定其化学防治的最适浓度。
2.2 施药后珠兰花病叶数量
由表1可知，不同的药剂浓度对试验产生的影响不同。施用200倍、400倍、600倍线灭稀释液的珠兰花上病叶的数量不会随着时间的延长而增加，而施用800倍与1 000倍稀释液的珠兰花上病叶的数量会随着时间的延长而开始增加。
2.3 施药后珠兰花线虫数量
由表2可知，施用200倍、400倍稀释液的珠兰病叶中并无活线虫的存在，施用600倍、800倍、1 000倍稀释液的珠兰病叶中皆有活线虫的存在且线灭稀释倍数越高，其病叶中线虫数量越多，施用600倍稀释液的珠兰叶片中仅存在极少的线虫。
综上可知，施药后珠兰花上病叶数量及病叶中线虫的数量整体上是随着线灭稀释倍数的增加而增加。施用200倍、400倍稀释液的珠兰无论是病叶增加的数量还是病叶中线虫的数量皆为0，防治效果最佳。施用600倍稀释液后线虫有极少的残留，但珠兰病叶的数量也不增加，不会对珠兰花的产量和质量产生影响。考虑到要节省成本以达到经济效益最大化以及高浓度的药剂对植株、环境的危害，认为线灭乳油剂600倍稀释液效果最好。
3 討论与结论
珠兰叶斑线虫病是珠兰花上常见的一种病害，严重威胁着我国南方省区的珠兰花生产，探寻安全、有效、无公害的防治方法是发展的方向[5]。该试验中2种剂型的药剂所取得的防治效果不同，这主要与该病原线虫存在的部位有关。珠兰叶斑线虫病由一种滑刃线虫引起[6]，在分类学上被鉴定为草莓芽叶线虫[7]。珠兰芽是该线虫的栖息地和越冬场所，病原线虫自气孔侵入叶片，寄生在叶内[8]。因此，针对叶片和叶芽进行防治的乳油剂取得了较好的效果。这一结果对于人们进行其他病虫害的化学防治有一定的指导作用。在进行其他病害的化学防治时，也应从该病害的病原切入，了解病原的习性，研发与选取合适的药剂，针对病原所在部位进行防治，才能经济高效地减少病害的发生，降低病害所带来的损失。
该试验结果表明，颗粒剂（杀线通）对珠兰叶斑线虫病的防治无效，200倍、400倍2组浓度的线灭乳油剂均能完全杀死珠兰病叶中的线虫，从而阻止病叶的增加，施用600倍线灭后虽有极少的线虫残留，但病叶的数量也不会增加，不会影响珠兰花的产量与质量。考虑到企业生产过程中要节约成本以达到经济最大化，降低药剂对作物、环境带来的危害等因素，确认珠兰花叶斑线虫病化学防治的最适浓度为600倍稀释液。植物线虫分布广泛，危害严重，其防治工作将是一个长期的课题[2]，研究出更高效高能的药剂仍需广大学者继续探索。该试验是在自然环境下的控制试验，其结果可为更高效高能藥剂的研究提供参考。同时也对歙县当地珠兰花企业的生产有一定的指导作用。
参考文献
[1] 余怡生.徽州特产：歙县珠兰花茶[J].茶业通报，1980（Z1）：110-112.
[2] 杨荣铮，储烨，董秀林，等.珠兰叶线虫病的研究[J].茶业通报，1991（2）：27-29.
[3] 黄耀师，梁震，李丽.我国植物线虫研究和防治进展[J].农药，2000，39（2）：11-13.
[4] 刘丹，颜冬冬，毛连纲，等.阿维菌素防治植物线虫的研究进展[J].湖南农业大学学报（自然科学版），2013（S1）：83-87.
[5] 张修军，程瑚瑞.几种药剂对珠兰叶斑线虫的作用与防治效果[J].湖北农学院学报，1995（1）：11-16.
[6] 程瑚瑞，张永存，方中达.金粟兰叶斑线虫病研究初报[J].南京农业大学学报，1985（3）：1.
[7] 张修军，张永存，程瑚瑞，等.盆钵珠兰叶斑线虫病的研究：Ⅰ.病原鉴定[J].南京农业大学学报，1988，11（4）：41-46.
[8] 张永存，张修军，程瑚瑞，等.珠兰叶斑线虫病的发生发展[J].上海农业学报，1989，5（2）：69-74.
关键词 珠兰花叶斑线虫病；颗粒剂；乳油剂；化学防治
中图分类号 S48 文献标识码 A 文章编号 0517-6611（2017）18-0120-03
Abstract [Objective] The aim was to explore chemical control methods for leaf spot nematode of pearl orchid. [Method] Two forms of avermectin like granular medicament and emulsifiable pesticide were used to control the diseases of pearl orchid caused by the leaf nematode. The granularmedicament acted on soil， while the other emulsion acted on leaf and leaf buds. [Result] The granular medicament was inoperative in the control of leaf spot nematode， which the emulsion was effective in prevention and treatment of nematode disease， and the screened optimum dilution ratio in our experiment was 600 times. [Conclusion] The results will provide reference for prevention and control of diseases of pearl orchid for local enterprise in Shexian.
Key words Pearl spot nematode disease；Granules；Emulsifiable concentrate；Chemical control
珠兰花茶窨制历史悠久，歙县三大花茶品类之一，是徽州特产[1]。但近年来歙县珠兰植株上经常感染一种叶斑线虫病，该病是珠兰花培育中发生较严重的病害，被群众称为“落叶鬼”，主要为害珠兰叶片，造成大量落葉，严重降低珠兰花的产量和质量[2]。农业防治、物理防治、生物防治对这类由线虫引发的病害并没有好的成效[3]，所以必须探索化学防治方法。阿维菌素是一种防治线虫的高效药剂，在环境中无累积作用，对作物较安全[4]，歙县推广该药剂进行叶斑线虫病的防治，但其剂型与浓度仍待探索。应当地企业要求，笔者运用颗粒剂（杀线通）和乳油剂（线灭）2种剂型的阿维菌素对珠兰花叶斑线虫病的化学防治进行了研究，确定了最佳的剂型与最适浓度，以期为珠兰叶斑线虫病的化学防治和歙县的珠兰花生产提供理论依据。
1 材料与方法
1.1 材料
供试的自然发病珠兰病株由安徽歙县珠兰花基地提供；试验中所用线虫从发病珠兰花的新鲜病叶中用贝尔曼漏斗法提取得到；线灭和杀线通2种剂型的阿维菌素均由黄山市歙县珠兰花基地提供。
1.2 方法
试验于2016年在黄山学院南校区进行。
1.2.1 药剂种类筛选。
试验选用3盆生长及发病情况较为一致的珠兰花病株并对其进行1～3号编号。1号植株施用线灭600倍稀释液；2号植株施用杀线通50 mg/株；3号植株为对照组施用清水。使用液体的线灭药剂时，用小型喷雾器将配制好的线灭600倍稀释液均匀地喷洒在珠兰病株上，使得枝条及叶正、背面呈现雾水状为佳；施用固体的杀线通之前，将珠兰土壤上的杂草除去，并平整盆中的土壤。用电子秤按要求称取所需质量的杀线通颗粒，撒在土壤表面使其均匀平整。施药后3、6、9、12 d觀察3盆珠兰花病叶的症状变化。
1.2.2 药剂浓度筛选。
选用乳油剂线灭，选取6盆病株进行试验，设置5个处理组和1个对照组。在相同的管理条件下，分别用线灭200倍、400倍、600倍、800倍、1 000倍稀释液喷洒处理，对照组喷清水处理。从每盆珠兰中选取40片叶子，于药后5、10、15 d观察统计其中感染叶斑线虫病的叶片数量，计算出病叶感染率，并取下5 g病叶用贝尔曼漏斗法提取线虫，在显微镜下观察统计5 mL提取液中线虫数量并比较。
2 结果与分析
2.1 施药后珠兰病株症状
施药后3、6、9、12 d进行观察，发现12 d内1号病株上叶片的病斑颜色变化缓慢，病斑感染面积基本无差异；2号与3号病株病斑颜色随时间的推移迅速从初始的淡黄色向黑褐色转变（图1）。
现有研究表明，线虫仅为害珠兰叶片，线虫侵入叶片后初期病斑呈淡黄色，微突起，病部因失绿，对光照略透明，雨后或保湿情况下病斑背面呈水渍状，后期病斑变成棕红色，病叶正面突起，背面凹陷，最后病斑呈黑褐色，病部组织坏死，由于病斑受叶脉限制而呈多角形。病斑由初期发展到后期（病斑呈黑褐色）大约需10 d，其发展到叶面1/3时叶片开始脱落[2]。
由图1可知，1号植株叶片上病斑感染面积的扩散速度与病斑颜色的变化速度和研究结果不同，2号植株和3号植株叶片病害症状变化较明显，病斑颜色快速向黑褐色转变，感染面积逐渐扩大直至脱落，与研究结果相符。这一现象可能与施用药剂进行防治有关。施用杀线通的2号植株与施用清水3号植株观察结果相近，说明杀线通对叶斑线虫病的防治无效。施用线灭药剂的1号植株与2号、3号植株相比，病斑的颜色变化与扩散速度较慢，说明线灭对防治珠兰叶斑线虫病有较好的效果。这可能与线灭为乳油剂，作用于珠兰叶芽与叶片，而杀线通为颗粒剂，作用于土壤有关。 1991年杨荣铮等[2]进行过珠兰叶斑线虫病初侵染来源和侵入途径的研究，取珠兰各部位和土壤分别进行分离，发现该线虫仅存在珠兰叶片和叶芽上，其他部位和土壤中没有线虫的存在。这一结果也从侧面证实了对土壤进行化学防治并没有意义和效果。因此，杀线通等作用于土壤的颗粒剂不适合珠兰叶斑线虫病的化学防治。线灭药剂虽对线虫的防治有较明显的效果，但仍需确定其化学防治的最适浓度。
2.2 施药后珠兰花病叶数量
由表1可知，不同的药剂浓度对试验产生的影响不同。施用200倍、400倍、600倍线灭稀释液的珠兰花上病叶的数量不会随着时间的延长而增加，而施用800倍与1 000倍稀释液的珠兰花上病叶的数量会随着时间的延长而开始增加。
2.3 施药后珠兰花线虫数量
由表2可知，施用200倍、400倍稀释液的珠兰病叶中并无活线虫的存在，施用600倍、800倍、1 000倍稀释液的珠兰病叶中皆有活线虫的存在且线灭稀释倍数越高，其病叶中线虫数量越多，施用600倍稀释液的珠兰叶片中仅存在极少的线虫。
综上可知，施药后珠兰花上病叶数量及病叶中线虫的数量整体上是随着线灭稀释倍数的增加而增加。施用200倍、400倍稀释液的珠兰无论是病叶增加的数量还是病叶中线虫的数量皆为0，防治效果最佳。施用600倍稀释液后线虫有极少的残留，但珠兰病叶的数量也不增加，不会对珠兰花的产量和质量产生影响。考虑到要节省成本以达到经济效益最大化以及高浓度的药剂对植株、环境的危害，认为线灭乳油剂600倍稀释液效果最好。
3 討论与结论
珠兰叶斑线虫病是珠兰花上常见的一种病害，严重威胁着我国南方省区的珠兰花生产，探寻安全、有效、无公害的防治方法是发展的方向[5]。该试验中2种剂型的药剂所取得的防治效果不同，这主要与该病原线虫存在的部位有关。珠兰叶斑线虫病由一种滑刃线虫引起[6]，在分类学上被鉴定为草莓芽叶线虫[7]。珠兰芽是该线虫的栖息地和越冬场所，病原线虫自气孔侵入叶片，寄生在叶内[8]。因此，针对叶片和叶芽进行防治的乳油剂取得了较好的效果。这一结果对于人们进行其他病虫害的化学防治有一定的指导作用。在进行其他病害的化学防治时，也应从该病害的病原切入，了解病原的习性，研发与选取合适的药剂，针对病原所在部位进行防治，才能经济高效地减少病害的发生，降低病害所带来的损失。
该试验结果表明，颗粒剂（杀线通）对珠兰叶斑线虫病的防治无效，200倍、400倍2组浓度的线灭乳油剂均能完全杀死珠兰病叶中的线虫，从而阻止病叶的增加，施用600倍线灭后虽有极少的线虫残留，但病叶的数量也不会增加，不会影响珠兰花的产量与质量。考虑到企业生产过程中要节约成本以达到经济最大化，降低药剂对作物、环境带来的危害等因素，确认珠兰花叶斑线虫病化学防治的最适浓度为600倍稀释液。植物线虫分布广泛，危害严重，其防治工作将是一个长期的课题[2]，研究出更高效高能的药剂仍需广大学者继续探索。该试验是在自然环境下的控制试验，其结果可为更高效高能藥剂的研究提供参考。同时也对歙县当地珠兰花企业的生产有一定的指导作用。
参考文献
[1] 余怡生.徽州特产：歙县珠兰花茶[J].茶业通报，1980（Z1）：110-112.
[2] 杨荣铮，储烨，董秀林，等.珠兰叶线虫病的研究[J].茶业通报，1991（2）：27-29.
[3] 黄耀师，梁震，李丽.我国植物线虫研究和防治进展[J].农药，2000，39（2）：11-13.
[4] 刘丹，颜冬冬，毛连纲，等.阿维菌素防治植物线虫的研究进展[J].湖南农业大学学报（自然科学版），2013（S1）：83-87.
[5] 张修军，程瑚瑞.几种药剂对珠兰叶斑线虫的作用与防治效果[J].湖北农学院学报，1995（1）：11-16.
[6] 程瑚瑞，张永存，方中达.金粟兰叶斑线虫病研究初报[J].南京农业大学学报，1985（3）：1.
[7] 张修军，张永存，程瑚瑞，等.盆钵珠兰叶斑线虫病的研究：Ⅰ.病原鉴定[J].南京农业大学学报，1988，11（4）：41-46.
[8] 张永存，张修军，程瑚瑞，等.珠兰叶斑线虫病的发生发展[J].上海农业学报，1989，5（2）：69-74.