检测鞣花酸(EA)对胶质瘤U251细胞增殖、侵袭能力的影响并探讨其机制。
方法利用细胞计数试剂盒(CCK-8)法检测EA对U251细胞增殖能力的影响；利用流式细胞术检测EA对U251细胞凋亡和周期的影响。利用划痕实验、Transwell侵袭实验检测EA对U251细胞侵袭的影响。应用Western blot检测EA对U251细胞中B细胞淋巴瘤/白血病-2(bcl-2)、B细胞淋巴瘤/白血病-2相关X蛋白(bax)、半胱氨酰天冬氨酸特异性蛋白酶(Caspase)-3、基质金属蛋白酶(MMP)-9、MMP-2表达水平的影响。
结果EA能够明显抑制U251细胞的增殖，抑制作用呈时间、浓度依赖性，处理细胞48 h的半数抑制(IC50)浓度为39.24 μg/ml；流式凋亡分析中对照组、40 μg/ml的凋亡率分别为(2.41±1.74)%、(34.07±0.28)%，差异有统计学意义(P＝0.001)，表明EA能促进U251细胞凋亡。流式周期分析中对照组、40μg/ml组S期细胞百分比分别为(20.45±0.28)%、(47.75±2.02)%，差异有统计学意义(P＝0.000)，表明EA能引起细胞周期S期阻滞。EA作用48 h后，U251细胞中bax、Caspase-3的表达水平升高，bcl-2的表达水平下降。对照组、EA 5 μg/ml和10 μg/ml组24 h的划痕愈合率分别为(53.88±0.30)%、(36.82±0.56)%、(31.33±0.24)%，差异有统计学意义(P＝0.000，P＝0.000)；Transwell侵袭实验中对照组、EA 5 μg/ml和10 μg/ml组24 h的穿膜细胞数分别为(168.2±7.1)、(66.4±2.5)、(38.6±1.5)个，差异有统计学意义(P＝0.001，P＝0.000)。EA作用48 h后，U251细胞中MMP-9、MMP-2的表达水平下降。
结论EA能够抑制脑胶质瘤细胞U251的增殖和侵袭能力。