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目的 探讨血管平滑肌细胞表型转换、分化过程中E1A激活基因阻遏子(cellularrepressorofE1A stimulatedgenes, CREG)的表达变化及其相关机制。方法 将PCR扩增的CREG片段插入pGEX -4T -1原核表达载体,纯化的CREG融合蛋白免疫家兔以制备多克隆抗体。以人胸廓内动脉平滑肌细胞(humaninternalthoracicarterysmoothmusclecells,HITASY)为模型, [3H]标记脱氧胸苷掺入法测定去血清培养HITASY细胞DNA合成变化。以Western印迹观察HITASY细胞在去血清培养过程中SMα肌动蛋白、肌钙结合蛋白(calponin)的表达,RT- PCR和Western印迹分析去血清培养诱导CREGmRNA和蛋白表达变化;免疫组化法观察CREG在细胞内的表达及定位。结果 构建载体并成功得到抗CREG多克隆抗体。去血清培养可使HITASY细胞DNA合成明显降低。随去血清培养时间延长,除SMα肌动蛋白和肌钙结合蛋白表达逐渐上调之外,CREGmRNA转录活性和蛋白翻译合成亦上调。免疫组化显示去血清培养后,CREG蛋白在细胞内表达并主要位于细胞核周。结论 去血清能促使HITASY细胞由合成表型向收缩表型转换,同时伴CREGmRNA和蛋白表达上调。