【摘 要】
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N-乙酰基转移酶(N-acetyltransferase,NAT)是昆虫体内一种催化乙酰基团在乙酰辅酶A和胺之间转移的酶,主要与色素沉积、生理节律等有关.对已公布的家蚕(Bombyx mori)N-乙酰基
【机 构】
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浙江理工大学生命科学学院,杭州,310018;浙江理工大学生命科学学院,杭州310018;浙江省家蚕生物反应器和生物医药重点实验室,杭州310018
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N-乙酰基转移酶(N-acetyltransferase,NAT)是昆虫体内一种催化乙酰基团在乙酰辅酶A和胺之间转移的酶,主要与色素沉积、生理节律等有关.对已公布的家蚕(Bombyx mori)N-乙酰基转移酶基因BmNAT(GenBank登录号:NP_001040401.1)进行生物信息学分析:该基因序列全长763 bp,ORF为564 bp,编码187个氨基酸残基,分子质量21.4 kD;多序列比对表明BmNAT与脐橙螟(Amyelois transitella)同源蛋白质的序列相似性最高.通过原核表达的方法制备了融合BmNAT蛋白,经蛋白质纯化并免疫新西兰兔获得多克隆抗体.亚细胞定位显示BmNAT主要存在于细胞质和细胞核中.利用Western blotting检测BmNAT在家蚕不同发育时期和5龄幼虫各组织器官的表达谱,结果表明BmNAT在蛾、卵期以及5龄幼虫的头部表达量较高,与BmNAT的qRT-PCR检测结果基本一致,初步推断BmNAT可能在家蚕的这些组织或发育时期发挥一定的生物学功能.流式细胞实验显示BmNAT对细胞周期可能存在一定的影响.
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