表达人白细胞介素10的逆转录病毒载体的构建

• 作 者: 李锦华 廖晓星 陈永雄 张仕光 刘军
• 机 构: 中山医科大学附属第一医院急诊科,中山医科大学附属第一医院急诊科,中山医科大学附属第一医院,中山医科大学附属第一医院,广州医学院附属第二医院儿科 广州 510080,广州 510080,肾脏研究所 广州
• 出 处: 现代临床医学生物工程学杂志
• 发表日期: 1998年02期
• 关键词: 逆转录病毒载体 白细胞介素 电泳鉴定 Interleukin 作用机制 斑点杂交 细胞因子 地高辛标记 翻译起始密码子 包装细胞

目的 建立一个表达人白细胞介素10(human Interleukin 10,hIL—10)的重组逆转录病毒载体基因转移系统,为下一步的研究工作做准备.方法 用限制性内切酶消化,提取和纯化质粒puhIL—10中hIL全长 cDNA,重组到逆转录病毒载体 pLXSN上,采用斑点杂交筛选,限制性内切酶消化,电泳鉴定分析.结果外源性hIL—10基因成功构建到逆转录病毒载体pLXSN上.结论表达人白细胞介素10的逆转录病毒载体的成功构建,为今后研究hIL—10的作用机制及在治疗疾病中的应用打下了基础.

OBJECTIVE: To establish a recombinant retroviral vector gene transfer system expressing human Interleukin 10 (hIL-10), and to prepare for the further research.Methods Plasmid was extracted and purified by restriction endonuclease The full-length hIL-10 cDNA of hIL-10 was recombined into the retroviral vector pLXSN, and identified by dot blot hybridization, restriction endonuclease digestion and electrophoresis analysis.Results The exogenous hIL-10 gene was successfully constructed into retroviral vector pLXSN .Conclusion The successful construction of retroviral vector expressing human interleukin-10 laid the foundation for the future study of the mechanism of action of hIL-10 and its application in the treatment of diseases.