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摘要：由于食品工业的迅速发展，食品添加剂在食品加工方面扮演着越来越重要的角色。如何确保食品添加剂的安全性问题，如何加强对食品安全的检测和鉴定，也成为了社会关注的热点问题。本文通过对检测方法的优化，将国家标准中规定的不同检测方法测定的五种食品添加剂进行一次性测定，提高了食品质量监督工作的效率。
关键词：高效液相色谱 食品添加剂 食品安全
中图分类号：TS202 文献标识码：A 文章编号：1672-5336（2014）14-0036-03
1 快速检测方法的提出
在食品质量监督工作中，由于同一种食品一般含有多种食品添加剂，因此在对食品进行检测时，往往需要进行多次检测，费时费力，而且容易发生漏检的情况，降低了检验工作的工作效率，不利于加强对食品添加剂的控制。本文利用高效液相色谱仪，可以实现在同条件下的五种常见食品添加剂的同时检测，如此可以使检测的周期缩短，满足消费者的需求，方便了检测机构的检验工作，使产品质量得到了更好地控制，同时也能极大降低漏检情况发生的可能性。
2 检测准备
2.1 检测仪器
氮吹仪，旋转蒸发器；压缩空气机；FID检测器；HP——`5毛细管柱；高效液相色谱仪；二极管阵列检测器；自动进样器；超声波振荡仪；反相色谱柱。
2.2 实验样品和试剂
超纯水（18MΩ.cm），219g/L乙酸锌溶液，20g/L NaHCO3溶液，106g/L亚铁氰化钾溶液，0.02mol/L乙酸铵，甲醇（HPLC）。苯甲酸、糖精钠、安赛蜜、山梨酸，脱氢乙酸，尼泊金乙醋、丙酯，乙醚，丙酮，10g/L碳酸氢钠溶液，1g/100mL碳酸氢钠溶液。
3 实验内容
3.1 仪器条件
DiamonsilC185μm250x4.6nnn反相色谱柱，检测波长：230nn，流速：1.0ml/min；流动相：0.02mol/L NH4As+甲醇梯度洗脱，柱温：35℃；进样量为：20μL。
3.2 样品前处理方法
对于液体样品，要取用适量，使用超声进行脱气，将酸碱度控制在6—7左右之后，选用蒸馏水进行稀释操作，对于含有蛋白质的液体样品，要沉淀蛋白质，可以在定容之前，使用少量的亚铁氰化钾及乙酸锌做沉淀剂使蛋白质沉淀，最后使用0.45μm的滤膜进行过滤操作，得到滤液；对于固体样品，首先需要切碎样品，不含或者含蛋白质较少的固体样品，可以在切碎后直接使用蒸馏水溶解、定容，按照实验检测要求稀释到相应倍数，经过滤后收集滤液。对于含蛋白质较多的样品，将固体溶解后，需要执行与液体相同的操作，即先沉淀蛋白质后过滤，获得滤液。
4 实验环境的选择
4.1 色谱柱的选择
由于我们检测的样品通常溶于水相体系，所以我们选择DiamonsilC185μm250x4.6nnn反相色谱柱进行分析。
4.2 选择检测波长
我们通过光电二极管阵列检测器，得到检测的5种食品添加剂的光谱图分别如图4.1-图4.5所示。
以图4.1-图4.5可见安赛蜜在229nm处出现最大吸收峰；苯甲酸在227nm处出现最大吸收峰；山梨酸在257nm处出现最大吸收峰；糖精钠在最大吸收峰在216nm处出现最大吸收峰；脱氢乙酸在234nm处出现最大吸收峰。根据这些数据可发现这几种样品在检测波长230nm处相对都比较灵敏，因此，我们可以考虑使用230nm作为同时进行5种食品添加剂检测的检测波长。这样可以简化工作量，简短检测时间，降低漏检发生频率，便于加强对食品安全的监督工作。
4.3 流动相比例的选择
根据国家相关标准，选择乙酸铵与甲醇作为流动相。有关数据表明，前17分钟流动相等度洗脱以比例（19+9）混合，17至25分钟进行梯度洗脱，流动相在（75+25）的比例比较适合。试验谱图见图4.6。
4.4 柱温的选择
液相色谱检测器受温度影响不大，但为了提高精确度，降低噪音，此次实验选择柱温在35℃。
4.5 液体流速的选择
流动相的流速会影响被分析对象的保留时间、灵敏度、分离度等。流速过慢会延长出峰时间，容易造成峰变形，出现拖尾峰，而流速过高，又会对系统产生压力，所以综合考虑，为了保证能够较好实现分离，我们选择流速在1.0mL/min。
4.6 进样量和进样时间的选择
为避免柱过载的发生，进样量应控制在峰高或峰面积与进样量呈线性关系的范围内，而不宜过大，否则极易造成重叠峰、平顶峰等现象，影响实验分析，同时还容易对柱子造成污染，降低柱效；而当进样量太小时，又可能造成不能出峰的问题。因此，根据实验经验，我们选择进样量在5到20匹之间。此次实验我们选定20匹。
5 结果与讨论
5.1 标准曲线的制定
对于能够溶于水的安赛蜜，糖精钠，山梨酸，分别称取各0.1000g，使用蒸馏水进行溶解，之后使用100mL容量瓶定容，获得1mg/mL的标准储备溶液；对于不能溶于睡的苯甲酸和脱氢乙酸，在分别称取样品0.1000g后，使用5mL碳酸氢钠溶液（20g/L）进行加热溶解，之后，再将溶解得到的溶液转移到100rnL容量瓶中进行定容，配制成1mg/mL的储备溶液；分别吸取部分各储备溶液，稀释得到0.01mg/mL、0.02mg/mL、0.04mg/mL以及0.05mg/mL的使用液，然后测定这些混合标准溶液，绘制标准曲线。我们选取x轴表示质量浓度，y轴表示峰面积，可以得到相应的线性回归方程。如图 5.1～5.5所示。
5.2 仪器的灵敏度和稳定性
随着浓度的升高，到达一定程度时，标准曲线会出现明显衰减，这就说明高浓度和低浓度的线性规律并不相同，所以标准曲线的绘制应该根据实际情况具体来制作。本文根据具体情况绘制的标准曲线，线性相关系数都在0.9990以上。仪器有相对较高的灵敏度，检出限比较低，液相测尼泊金乙醋，丙酷，安赛蜜，糖精钠，山梨酸，苯甲酸，脱氢乙酸分别为0.0012，0.0018， 0.0002，0.0005，0.0002，0.0001，0.0022mg/kg，完全满足实验分析的要求。
6 优势分析
气相法进行样品测定时，需要经过繁琐的前处理，步骤繁多，从而影响回收率，尤其是对于固体样品，带来的影响更大。而本文将原本根据国家标准应用气相法检测的脱氢乙酸，经过实验和优化，与日常检测中经常遇到的食品添加剂同时处理检测，如此可以提高效率。而且对于脱氢乙酸来说，使用国标通用的气相色谱法的回收率仅仅在80%左右，而本文中的方法回收率能达到90%以上，而且方便快捷。
参考文献
[1]邓立刚，李增梅，赵善仓，赵平娟，郭长英.高效液相色谱法测定乳饮料和果汁饮料中的安赛蜜和糖精钠[J].山东农业科学，2007，（03）.
[2]龙朝阳，许秀敏.食品中4种常用尼泊金醋的高效液相色谱法测定[J].中国卫生检验杂志，2005，（01）.
[3]肖有玉.高效刻目色谱法测定固体食品中安赛蜜[J].中国食品发酵，2007，（02）.
关键词：高效液相色谱 食品添加剂 食品安全
中图分类号：TS202 文献标识码：A 文章编号：1672-5336（2014）14-0036-03
1 快速检测方法的提出
在食品质量监督工作中，由于同一种食品一般含有多种食品添加剂，因此在对食品进行检测时，往往需要进行多次检测，费时费力，而且容易发生漏检的情况，降低了检验工作的工作效率，不利于加强对食品添加剂的控制。本文利用高效液相色谱仪，可以实现在同条件下的五种常见食品添加剂的同时检测，如此可以使检测的周期缩短，满足消费者的需求，方便了检测机构的检验工作，使产品质量得到了更好地控制，同时也能极大降低漏检情况发生的可能性。
2 检测准备
2.1 检测仪器
氮吹仪，旋转蒸发器；压缩空气机；FID检测器；HP——`5毛细管柱；高效液相色谱仪；二极管阵列检测器；自动进样器；超声波振荡仪；反相色谱柱。
2.2 实验样品和试剂
超纯水（18MΩ.cm），219g/L乙酸锌溶液，20g/L NaHCO3溶液，106g/L亚铁氰化钾溶液，0.02mol/L乙酸铵，甲醇（HPLC）。苯甲酸、糖精钠、安赛蜜、山梨酸，脱氢乙酸，尼泊金乙醋、丙酯，乙醚，丙酮，10g/L碳酸氢钠溶液，1g/100mL碳酸氢钠溶液。
3 实验内容
3.1 仪器条件
DiamonsilC185μm250x4.6nnn反相色谱柱，检测波长：230nn，流速：1.0ml/min；流动相：0.02mol/L NH4As+甲醇梯度洗脱，柱温：35℃；进样量为：20μL。
3.2 样品前处理方法
对于液体样品，要取用适量，使用超声进行脱气，将酸碱度控制在6—7左右之后，选用蒸馏水进行稀释操作，对于含有蛋白质的液体样品，要沉淀蛋白质，可以在定容之前，使用少量的亚铁氰化钾及乙酸锌做沉淀剂使蛋白质沉淀，最后使用0.45μm的滤膜进行过滤操作，得到滤液；对于固体样品，首先需要切碎样品，不含或者含蛋白质较少的固体样品，可以在切碎后直接使用蒸馏水溶解、定容，按照实验检测要求稀释到相应倍数，经过滤后收集滤液。对于含蛋白质较多的样品，将固体溶解后，需要执行与液体相同的操作，即先沉淀蛋白质后过滤，获得滤液。
4 实验环境的选择
4.1 色谱柱的选择
由于我们检测的样品通常溶于水相体系，所以我们选择DiamonsilC185μm250x4.6nnn反相色谱柱进行分析。
4.2 选择检测波长
我们通过光电二极管阵列检测器，得到检测的5种食品添加剂的光谱图分别如图4.1-图4.5所示。
以图4.1-图4.5可见安赛蜜在229nm处出现最大吸收峰；苯甲酸在227nm处出现最大吸收峰；山梨酸在257nm处出现最大吸收峰；糖精钠在最大吸收峰在216nm处出现最大吸收峰；脱氢乙酸在234nm处出现最大吸收峰。根据这些数据可发现这几种样品在检测波长230nm处相对都比较灵敏，因此，我们可以考虑使用230nm作为同时进行5种食品添加剂检测的检测波长。这样可以简化工作量，简短检测时间，降低漏检发生频率，便于加强对食品安全的监督工作。
4.3 流动相比例的选择
根据国家相关标准，选择乙酸铵与甲醇作为流动相。有关数据表明，前17分钟流动相等度洗脱以比例（19+9）混合，17至25分钟进行梯度洗脱，流动相在（75+25）的比例比较适合。试验谱图见图4.6。
4.4 柱温的选择
液相色谱检测器受温度影响不大，但为了提高精确度，降低噪音，此次实验选择柱温在35℃。
4.5 液体流速的选择
流动相的流速会影响被分析对象的保留时间、灵敏度、分离度等。流速过慢会延长出峰时间，容易造成峰变形，出现拖尾峰，而流速过高，又会对系统产生压力，所以综合考虑，为了保证能够较好实现分离，我们选择流速在1.0mL/min。
4.6 进样量和进样时间的选择
为避免柱过载的发生，进样量应控制在峰高或峰面积与进样量呈线性关系的范围内，而不宜过大，否则极易造成重叠峰、平顶峰等现象，影响实验分析，同时还容易对柱子造成污染，降低柱效；而当进样量太小时，又可能造成不能出峰的问题。因此，根据实验经验，我们选择进样量在5到20匹之间。此次实验我们选定20匹。
5 结果与讨论
5.1 标准曲线的制定
对于能够溶于水的安赛蜜，糖精钠，山梨酸，分别称取各0.1000g，使用蒸馏水进行溶解，之后使用100mL容量瓶定容，获得1mg/mL的标准储备溶液；对于不能溶于睡的苯甲酸和脱氢乙酸，在分别称取样品0.1000g后，使用5mL碳酸氢钠溶液（20g/L）进行加热溶解，之后，再将溶解得到的溶液转移到100rnL容量瓶中进行定容，配制成1mg/mL的储备溶液；分别吸取部分各储备溶液，稀释得到0.01mg/mL、0.02mg/mL、0.04mg/mL以及0.05mg/mL的使用液，然后测定这些混合标准溶液，绘制标准曲线。我们选取x轴表示质量浓度，y轴表示峰面积，可以得到相应的线性回归方程。如图 5.1～5.5所示。
5.2 仪器的灵敏度和稳定性
随着浓度的升高，到达一定程度时，标准曲线会出现明显衰减，这就说明高浓度和低浓度的线性规律并不相同，所以标准曲线的绘制应该根据实际情况具体来制作。本文根据具体情况绘制的标准曲线，线性相关系数都在0.9990以上。仪器有相对较高的灵敏度，检出限比较低，液相测尼泊金乙醋，丙酷，安赛蜜，糖精钠，山梨酸，苯甲酸，脱氢乙酸分别为0.0012，0.0018， 0.0002，0.0005，0.0002，0.0001，0.0022mg/kg，完全满足实验分析的要求。
6 优势分析
气相法进行样品测定时，需要经过繁琐的前处理，步骤繁多，从而影响回收率，尤其是对于固体样品，带来的影响更大。而本文将原本根据国家标准应用气相法检测的脱氢乙酸，经过实验和优化，与日常检测中经常遇到的食品添加剂同时处理检测，如此可以提高效率。而且对于脱氢乙酸来说，使用国标通用的气相色谱法的回收率仅仅在80%左右，而本文中的方法回收率能达到90%以上，而且方便快捷。
参考文献
[1]邓立刚，李增梅，赵善仓，赵平娟，郭长英.高效液相色谱法测定乳饮料和果汁饮料中的安赛蜜和糖精钠[J].山东农业科学，2007，（03）.
[2]龙朝阳，许秀敏.食品中4种常用尼泊金醋的高效液相色谱法测定[J].中国卫生检验杂志，2005，（01）.
[3]肖有玉.高效刻目色谱法测定固体食品中安赛蜜[J].中国食品发酵，2007，（02）.