高效抑制核因子κ—B的茎环RNA基因序列的获得

• 作 者: 黄海 杜涛 黄健 许可慰 尹心宝 林天歆 江春 韩金利 郭正
• 机 构: 广州市沿江西路107号中山大学附属第二医院泌尿外科
• 出 处: 中华腔镜泌尿外科杂志（电子版）
• 发表日期: 2009年5期
• 关键词: 核因子kappa—B 前列腺癌 RNA干扰 Nuclear factor kappa-B Prostate carcinoma RNA interferen
• 基金项目: 广东省自然科学基金（001356,05100980,05300720）,广东省医学科学基金（A2008178）

目的获得高效抑制前列腺癌细胞株Lncap中核因子kappa—B表达的shRNA序列。方法根据核因子kappa—B基因信息，设计siRNA1、siRNA2、siRNA3三条针对核因子kappa-B基因cds区的siRNA序列及无意义的对照序列，组建与之对应的4对互补的单链DNA序列，包括siRNA的正义链和反义链：正义链序列按5’向3’顺序依次为：酶切位点（BamH Ⅰ）、干扰序列（19bp）、loop环（TFCAAGAGA）、干扰序列的反向互补序列（19bp）、中止信号（TTTTT）、酶切位点（EcoR