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目的:克隆绝缘子元件并验证其绝缘功能,为转基因载体的构建提供条件。方法:以GenBank提供的绝缘子序列设计引物.应用PCR方法,从鸡的基因组序列中克隆绝缘子,酶切、测序鉴定;将绝缘子亚克隆至表达载体pEGFP-N2,体外扩增纯化后瞬时转染COS7细胞,72h后收获细胞.荧光显微镜下观察EGFP表达情况。结果:绝缘子元件成功克隆,酶切、测序鉴定序列正确:体外试验证实,亚克隆有绝缘子的载体与对照组比较,EGFP表达水平显著降低。结论:绝缘子元件成功克隆。且在体外具有绝缘功能,能够与目的基因共同构建转基因载体