肿瘤坏死因子受体相关因子2对胃癌细胞生物学行为的影响及其机制

• 作 者: 戴菡珏 徐晶晶 李文静 国风
• 机 构: 南京医科大学附属常州第二人民医院肿瘤中心 213000,苏州大学附属第一医院检验科 215006,苏州市立医院检验科 215005,苏州市立医院肿瘤科 215005
• 出 处: 中华肿瘤杂志
• 发表日期: 2019年41期
• 关键词: 胃肿瘤 肿瘤坏死因子受体相关因子2 细胞生长 迁移 侵袭 核转录因子κB

目的

探讨肿瘤坏死因子受体相关因子2(TRAF2)对胃癌AGS细胞生长、迁移和侵袭等细胞生物学行为的影响及机制。

方法

构建低表达TRAF2的胃癌AGS细胞株(AGS-siTRAF2)，采用xCELLigence系统和细胞活力实验检测细胞的生长和增殖情况。采用流式细胞术检测细胞凋亡和细胞周期，采用xCELLigence系统和Transwell实验检测细胞的迁移和侵袭能力。采用Western blot法和TransAM法检测低表达TRAF2对AGS细胞核转录因子κB(NF-κB)信号通路的影响。采用免疫组化法检测胃癌组织中TRAF2的表达，分析TRAF2表达与胃癌临床病理特征的关系和对患者生存的影响。

结果

xCELLigence系统动态检测结果显示，从8 h开始，AGS-siTRAF2细胞的生长速度明显慢于AGS-sictrl细胞。细胞活力实验显示，培养24、48和72 h时，AGS-siTRAF2细胞的吸光度(A)值分别为51 296.00±2 631.06、68 389.25±6 703.21和65 559.50±6 339.22，均显著低于AGS-sictrl细胞(均P<0.001)。流式细胞术检测结果显示，培养24、48和72 h时，AGS-siTRAF2细胞凋亡率分别为(1.42±0.07)%、(2.98±0.11)%和(1.56±0.03)%，均显著高于AGS-sictrl细胞(均P<0.05)；AGS-siTRAF2细胞S期占(23.57±1.12)%，对照组为(19.49±1.19)%，差异有统计学意义(P＝0.012)。xCELLigence系统检测显示，从3 h开始，AGS-siTRAF2细胞的迁移能力低于AGS-sictrl细胞。Transwell实验检测结果显示，培养24 h后，AGS-sictrl的细胞数为(121.7±6.7)个，AGS-siTRAF2的细胞数为(84.0±6.6)个，AGS-siTRAF2细胞的迁移细胞数明显少于AGS-sictrl细胞(P＝0.002)。xCELLigence系统检测结果显示，从3 h开始，AGS-siTRAF2细胞的细胞指数低于AGS-sictrl细胞。Transwell实验检测结果显示，培养24 h，AGS-sictrl的细胞数为(109.3±3.1)个，AGS-siTRAF2的细胞数为(79.0±6.2)个，AGS-siTRAF2细胞的穿膜细胞数明显少于AGS-sictrl细胞(P＝0.002)。Western blot检测结果显示，AGS-siTRAF2细胞中RelA、RelB、p50和p52表达水平均明显低于AGS-sictrl细胞。TransAM检测结果显示，AGS-siTRAF2细胞中RelA、RelB、p50和p52的活性分别为0.01±0.00、0.01±0.01、0.92±0.01和0.53±0.03，均低于AGS-sictrl细胞(均P<0.001)。100例胃癌组织中TRAF2高表达率为53.0%，高于癌旁组织(38.0%)，差异有统计学意义(P＝0.033)。在管状腺癌、分化程度低、T分期高、N分期高及TNM分期高的胃癌组织中TRAF2高表达率更高(均P<0.05)。TRAF2高表达组和低表达组患者的中位生存时间分别为17和78个月，差异有统计学意义(P＝0.010)。

结论

TRAF2低表达能显著抑制胃癌AGS细胞的生长、迁移和侵袭能力。胃癌组织中TRAF2的表达增高，TRAF2的表达与胃癌的预后有关。