目的 探讨增殖诱导配体(APRIL)对结直肠癌细胞生长和转移的影响,以进一步明确APRIL在结直肠癌生物学行为中的作用.方法 APRIL基因的小干扰RNA质粒载体(APRIL-siRNA)转染人结直肠癌细胞SW480,重组人APRIL蛋白(rhAPRIL)刺激结直肠癌细胞HCT-116,采用CCK-8法检测细胞的增殖能力,流式细胞术检测细胞周期变化,Western blot检测细胞周期和凋亡调控蛋白cyclin D1、p21和Bcl-2的表达水平,Transwell小室侵袭和转移试验分析细胞侵袭及转移能力,逆转录聚合酶链反应检测基质金属蛋白酶2(MMP-2)和MMP-9 mRNA的表达变化.APRIL-siRNA转染的结直肠癌细胞SW480接种裸鼠,分析APRIL-siRNA对移植瘤生长和MMP表达的影响.结果 APRIL-siRNA组G0/G1期细胞比例(73.5％)高于非特异性序列转染组(53.9％)和未转染组(51.1％,均P＜0.05).刺激48 h后,400 ng/ml rhAPRIL组和800 ng/ml rhAPRIL组HCT-116细胞G0/G1期细胞比例(分别为34.9％和22.7％)低于未刺激组(45.1％,均P＜0.05).转染48 h后,与非特异性序列转染组相比,APRIL-siRNA组SW480细胞cyclin D1和Bcl-2蛋白表达下降,p21蛋白表达增高.刺激48 h后,与未刺激组相比,400 ng/ml rhAPRILHCT-116细胞组cyclin D1和Bcl-2蛋白表达升高,p21蛋白表达下降.APRIL-siRNA转染SW480细胞后,APRIL-siRNA组Transwell小室滤膜上每低倍视野侵袭和转移细胞数低于非特异性序列转染组.rhAPRIL(100 ng/ml)刺激HCT-116细胞后,侵袭和转移细胞数均高于未刺激组.APRIL-siRNA组SW480细胞中MMP-2和MMP-9 mRNA相对表达水平低于非特异性序列转染组.rhAPRIL刺激48 h后,HCT-116细胞中MMP-2和MMP-9 mRNA相对表达水平明显高于未刺激组.与非特异性序列转染组和未转染组相比,APRIL-siRNA组移植瘤的生长速度较缓慢,APRIL-siRNA组移植瘤组织中APRIL、MMP-2和MMP-9蛋白表达量明显降低.结论 APRIL可促进结直肠癌细胞的生长及转移,与移植瘤的形成有关.
结直肠癌细胞增殖诱导配体的异常表达促进肿瘤的生长和转移
【摘 要】
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目的 探讨增殖诱导配体(APRIL)对结直肠癌细胞生长和转移的影响,以进一步明确APRIL在结直肠癌生物学行为中的作用.方法 APRIL基因的小干扰RNA质粒载体(APRIL-siRNA)转染人结直肠癌细胞SW480,重组人APRIL蛋白(rhAPRIL)刺激结直肠癌细胞HCT-116,采用CCK-8法检测细胞的增殖能力,流式细胞术检测细胞周期变化,Western blot检测细胞周期和凋亡调控蛋
【机 构】
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(226001南通大学附属医院检验医学中心南通大学检验医学研究所),(226001南通大学附属医院检验医学中心南通大学检验医学研究所),(226001南通大学附属医院检验医学中心南通大学检验医学研究所
【出 处】
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中华肿瘤杂志
【发表日期】
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2013年35期
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