【摘 要】
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目的制备甲胎蛋白(AFP)特异性CD8＋T淋巴细胞肝癌疫苗，检测其体外抗肿瘤免疫活性，探讨其分子作用机制。方法采用经AFP抗原决定簇肽(AFP542-550)或转染AFP慢病毒刺激树突状细胞(AFP542-550/Lenti-AFP-DC)的方法，体外活化AFP特异性CD8＋T细胞(AFP-CD8＋-CTL)。用抗人CD134单抗/抗人CD28单抗分别封闭和活化AFP-CD8＋-CTL，观察其体外
【机 构】
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200072 上海，同济大学附属第十人民医院肝胆外科,上海交通大学附属上海市第一人民医院感染科,200072 上海，同济大学附属第十人民医院肝胆外科,200072 上海，同济大学附属第十人民医院肝胆外
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目的制备甲胎蛋白(AFP)特异性CD8＋T淋巴细胞肝癌疫苗，检测其体外抗肿瘤免疫活性，探讨其分子作用机制。
方法采用经AFP抗原决定簇肽(AFP542-550)或转染AFP慢病毒刺激树突状细胞(AFP542-550/Lenti-AFP-DC)的方法，体外活化AFP特异性CD8＋T细胞(AFP-CD8＋-CTL)。用抗人CD134单抗/抗人CD28单抗分别封闭和活化AFP-CD8＋-CTL，观察其体外杀伤HepG2细胞的作用以及IFN-γ、IL-2、穿孔素(Perforin)、颗粒酶B(Granzyme B)、FasL等细胞因子的释放，间接推测穿孔素-颗粒酶B在其抗肿瘤过程中的作用。
结果抗人CD134单克隆抗体封闭AFP-CD8＋-CTL后，AFP-CD8＋-CTL体外杀伤HepG2细胞产生的γ干扰素、白介素-2、穿孔素/颗粒酶B等细胞因子明显减少(P<0.05)，而FasL下降不明显。应用抗人CD28单抗体外活化AFP-CD8＋-CTL后并与HepG2细胞共同培养后发现，AFP特异性T细胞肝癌疫苗杀伤HepG2肝癌细胞的效能显著增加(P<0.05)，而FasL增加不明显。
结论抗人CD134单克隆抗体可用于体外抑制AFP-CD8＋-CTL对肿瘤细胞的杀伤作用，而抗人CD28单克隆抗体可体外活化AFP-CD8＋-CTL。AFP特异性CD8＋T淋巴细胞肝癌疫苗杀伤HepG2细胞可能与穿孔素-颗粒酶B的释放有关。
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