【摘 要】
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目的探讨miR-17~92抑制质粒转染对紫衫醇耐药卵巢癌细胞的影响和作用机制,为卵巢癌耐药的研究提供理论依据。方法 2011年中国医科大学附属盛京医院,病毒介导法转染miR-17~92
【机 构】
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中国医科大学附属盛京医院妇产科,沈阳市妇婴医院,
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目的探讨miR-17~92抑制质粒转染对紫衫醇耐药卵巢癌细胞的影响和作用机制,为卵巢癌耐药的研究提供理论依据。方法 2011年中国医科大学附属盛京医院,病毒介导法转染miR-17~92抑制质粒,Real-time PCR及Western-Blot法检测转染前后miR-17~92及其靶基因表达,荧光素酶报告基因检测系统证明miR-17~92与靶基因3’UTR的直接结合作用。MTT比色法及流式细胞技术检测转染后耐药卵巢癌细胞增殖及细胞周期变化。结果耐药卵巢癌细胞SKOV3-TR30中miR-17~92高表达。转染miR-17~92-PTIP-Sponge all抑制质粒于耐药卵巢癌细胞抑制miR-17~92表达使细胞增殖受到抑制,紫杉醇浓度为100nM抑制作用最明显,抑制率为40.4%,P<0.05。不同浓度紫杉醇作用于转染的耐药细胞,使细胞阻滞在G2/M期,当其作用浓度为100nM时阻滞作用更明显,P<0.05。抑制miR-17~92表达且随着紫衫醇浓度的增加均可使BIM蛋白表达升高,P均<0.05,PTEN蛋白的表达虽均呈上升趋势,但均无统计学意义。结论 miR-17~92是与卵巢癌耐药最相关的miRNAs之一,抑制miR-17~92基因簇表达可以抑制耐药卵巢癌细胞的增殖,其影响卵巢癌耐药的机制是通过对BIM转录后水平的调节实现的。
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