H5N1禽流感病毒HA基因的重组腺病毒表达载体的构建

• 作 者: 王青 胡建和 徐彦召 朱国坡 郑素玲
• 机 构: 河南科技学院动物科学学院,中国农业科学院上海兽医研究所
• 出 处: 河南农业科学
• 发表日期: 2010年7期
• 关键词: 腺病毒载体 禽流感病毒 H5N1亚型 HA基因 载体构建 Recombinant adenovirus vector Avian influenza viru
• 基金项目: 基金项目：河南省高校杰出科研人才创新工程项目（2006KYCX020）

采用PCR方法扩增出禽流感病毒HA基因,将其定向插入pAdtrack-CMV腺病毒穿梭质粒中构建pAdtrack-H5,之后将pAdtrack-H5与腺病毒骨架质粒pAdeasy-1在基因工程菌BJ5183中进行同源重组,获得腺病毒质粒pAdeasy-H5,将pAdeasyd-H5经PacⅠ线性化后转染HEK293细胞株,包装出含有HA基因的腺病毒pAd-H5。结果表明：含有目的基因的腺病毒穿梭质粒pAdtrack-H5和含有目的基因的腺病毒质粒pAdeasy-H5经PCR、双酶切及核苷酸测序鉴定无误。包