猪圆环病毒2型荧光定量PCR检测方法的建立

• 作 者: 张福良 宋长绪 杨鸣琦 朱道中 蒋智勇 林志雄 刘燕玲 宋志军
• 机 构: 西北农林科技大学动物科技学院,陕西,杨凌,712100;广东省农科院兽医研究所,广东,广州,510640广东省农科院兽医研究所,广东,广州,510640西北农林科技大学动物科技学院,陕西,杨凌,712
• 出 处: 中国畜牧兽医学会养猪分会2006年学术年会暨第四次全国会员代表大会
• 发表日期: 2006年8期
• 关键词: 猪疾病 圆环病毒 ORF2 荧光定量检测 Taqman探针 检测方法

通过条件优化,以定量的10倍系列稀释的质粒pMD-ORF2为标准品进行荧光定量PCR扩增并制作标准曲线建立了PCV2的荧光定量PCR检测方法.结果表明，该方法检测灵敏度可达1.0×100拷贝/μL,线性范围为109～100,达10个数量级;对起始浓度为1.0×106、1.0×105、1.0×104拷贝/μL的标准品的最终实际测得值分别为1.000×106、0.935×105和0.987×104拷贝/μL,变异系数分别为2.527％、2.067％和2.092％,说明此方法具有良好的准确性和重现性.对阳性组织病料的检测表明该方法的检测灵敏度高出常规PCR,与nPCR具有相同的灵敏度.