论文部分内容阅读
目的：尝试B区缺失型FⅧ在毕赤酶母（P.pastoris)中的表达，探索rFⅧ在酵母中的表达情况和可能性。方法：将B区缺失型FⅧcDNA与质粒载体pPICZaA酶切、连接，构建了酵母表达载体pPICZα-∧△FⅧ，电击转染GS115酶母细胞，甲醇诱导表达，一步法对表达产物进行活性检测并进行Dot-Blot及Western-Blot分析。结果：随着发酵时间的延长，表达产物的凝血时间越来越长，而蛋白表达量越来越高。结论：rFⅧ在酵母中的表达产物不稳定，表达水平较低，表达方法须改进。