背景 基质细胞源性细胞因子1 α/趋化因子受体4(SDF-1α/CXCR4)信号途径是机体内介导多种细胞趋化、黏附以及增生的关键分子,能通过促进血管内皮祖细胞向肿瘤组织的迁移而促进肿瘤新生血管的发生,同时也参与新生血管性眼病的病理过程. 目的 探讨阻断CXCR4信号通路对实验性角膜新生血管(CNV)发生发展的抑制作用及机制.方法 收集8周龄BALB/c小鼠80只,将浸有1 mol/L NaOH的滤纸贴附在左眼角膜中央40 s以诱导小鼠CNV,按随机数字表法将动物分为透明质酸钠组(质量分数0.2％透明质酸钠点眼)及CXCR4拮抗剂组(0.2％透明质酸钠配制的CXCR4拮抗剂点眼),自碱烧伤当日分别用相应的药物点眼共14d,于第14天裂隙灯下观察两组小鼠的CNV,然后制备角膜悬液,用流式细胞技术检测角膜悬液中CD31的表达值；制备角膜组织切片,以逆转录PCR(RT-PCR)和Western blot法检测CXCR4 mRNA和蛋白在小鼠角膜组织中的表达,以免疫组织化学法检测角膜组织内CD31阳性标记的血管内皮细胞.以ELISA法检测角膜组织裂解液内血管内皮生长因子(VEGF)的表达.使用CXCR4拮抗剂干预小鼠腹腔来源的巨噬细胞,检测粒细胞巨噬细胞刺激因子(GM-CSF)刺激后培养上清液中VEGF的表达.结果 小鼠角膜碱烧伤后2周,裂隙灯下可见CNV达高峰,与透明质酸钠组比较,CXCR4拮抗剂组CNV明显减少；角膜免疫组织化学检测显示,CXCR4拮抗剂组小鼠角膜中CD31阳性染色强度弱于透明质酸钠组,CD31阳性细胞数量明显减少；进一步流式细胞技术检测发现,CXCR4拮抗剂组CD31阳性表达率为(9.50±2.34)％,明显低于透明质酸钠组的(17.50±3.16)％,差异有统计学意义(t=-7.312,P＜0.05);RT-PCR和Western blot法检测表明,碱烧伤后2、4、7d小鼠角膜组织中CXCR4 mRNA和蛋白的表达均明显高于正常小鼠角膜组织,组间比较差异均有统计学意义(P＜0.01；P＜0.05).ELISA检测结果显示,CXCR4拮抗剂点眼后4d、7d角膜组织内VEGF表达明显低于透明质酸钠组,差异均有统计学意义(t=10.927、5.151,P＜0.05).体外实验发现,细胞培养后12、24和48 h,GM-CSF+CXCR4拮抗剂组上清液中VEGF的表达水平明显低于GM-CSF组,差异均有统计学意义(P＜0.05). 结论 CXCR4拮抗剂能通过下调VEGF的表达抑制实验性CNV的形成。
趋化因子受体4拮抗剂对实验性角膜新生血管的抑制作用及其机制
【摘 要】
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背景 基质细胞源性细胞因子1 α/趋化因子受体4(SDF-1α/CXCR4)信号途径是机体内介导多种细胞趋化、黏附以及增生的关键分子,能通过促进血管内皮祖细胞向肿瘤组织的迁移而促进肿瘤新生血管的发生,同时也参与新生血管性眼病的病理过程. 目的 探讨阻断CXCR4信号通路对实验性角膜新生血管(CNV)发生发展的抑制作用及机制.方法 收集8周龄BALB/c小鼠80只,将浸有1 mol/L NaOH的滤
【机 构】
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215006苏州大学附属第一医院眼科,215006苏州大学附属第一医院眼科,215123苏州大学医学部细胞神经生物学研究室暨解剖学系,215006苏州大学附属第一医院眼科
【出 处】
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中华实验眼科杂志
【发表日期】
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2012年30期
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