牙龈卟啉单胞菌prtH基因克隆及其多态性的研究

• 作 者: 郑颖 杨圣辉 周伟 张春梅 张福萍 董小平
• 机 构: 首都医科大学附属北京口腔医院口腔医学研究所,首都医科大学附属北京口腔医院口腔医学研究所,中国预防医学科学院病毒学研究所形态室,首都医科大学附属北京口腔医院口腔医学研究所,中国预防医学科学院病毒学研究所
• 出 处: 中华口腔医学杂志
• 发表日期: 2003年38期
• 关键词: 龈 基因 结构 细菌 细菌学技术 牙龈卟啉单胞菌

目的建立牙龈卟啉单胞菌(Porphyromonas gingivalis,P.g)prtH全基因序列的克隆株,分析5株不同P.g菌株中prtH基因多态性.方法利用PCR技术获得prtH全基因序列,克隆至载体pGEM-T;设计3 对引物,用PCR的方法扩增prtH基因的不同区域;以生物素标记prtH基因序列为特异性探针,用斑点杂交和Southern印迹杂交进一步分析prtH基因的多态性.结果酶切分析和DNA测序证实重组质粒pGEM-T-prtH的插入片段为prtH基因序列;核酸分子杂交显示菌株W 381和ATCC 33277杂交类型一致,菌株ATCC 49417和菌株14-3-2呈现各自不同的杂交条带,而菌株47A-1中未检测到prtH基因.结论不同P.g菌株中prtH基因序列存在差别,这种基因多态性提示不同P.g菌株毒力大小可能存在差异.所建立的PCR扩增技术可以敏感地检测prtH 基因的存在.