结核分枝杆菌体内特异表达基因mshA的克隆表达及免疫组织化学分析

来源 :中华实验和临床感染病杂志(电子版) | 被引量 : 0次 | 上传用户:unian1981
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目的克隆、表达结核分枝杆菌体内特异表达基因mshA,并制备多克隆抗体进行免疫组织化学分析,研究其免疫原性、免疫反应性及体内表达情况。方法采用高保真PCR法扩增结核分枝杆菌mshA基因,将基因克隆入表达载体pET30a(+),证实序列正确后转化人大肠埃希菌BL21(DE3),并采用IPTG诱导表达。将重组蛋白大量表达纯化后免疫新西兰大白兔,制备多克隆抗体并进行亲和纯化,用重组MSHA蛋白与其多克隆抗体进行Westernblot鉴定。制备感染结核分枝杆菌的小鼠肺组织病理切片,尝试用免疫组织化学和抗酸染色法检测
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