叶用莴苣叶片总蛋白质双向电泳影响因素的研究

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以叶用莴苣叶片为试材,研究17cm固相pH梯度胶条(pH4~7)体系下双向电泳不同的提取方法、上样体积、定量方法等影响因素,力求确定其理想的双向电泳条件。结果表明,酚一甲醇/醋酸铵沉淀法对蛋白质提取更彻底,效果更好。对于蛋白质定量的试验,相比于常规的Bradford方法,利用无干扰蛋白质定量试剂盒具有更好的准确性。考虑叶片总蛋白质中大量Rubisco的存在,应相对增加上样量,采用考马斯亮蓝染色时取800μg到1100μg蛋白质进行双向电泳比较合理。
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