【摘 要】
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目的:从幽门螺杆菌(Hp)分离热休克蛋白A基因,并实现在大肠杆菌中的融合分泌表达.方法:提取Hp染色体DNA, 用PCR方法扩增hspA基因.经克隆、测序后,构建融合分泌表达载体pMAL-Hs
【机 构】
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北京生物工程研究所,北京,100071
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目的:从幽门螺杆菌(Hp)分离热休克蛋白A基因,并实现在大肠杆菌中的融合分泌表达.方法:提取Hp染色体DNA, 用PCR方法扩增hspA基因.经克隆、测序后,构建融合分泌表达载体pMAL-HspA,转化大肠杆菌,IPTG诱导表达.结果:分离得到了高度保守的354 bp的hspA基因片段,并在大肠杆菌中实现了该基因的融合分泌表达.在37℃诱导表达3 h后,其融合分泌表达蛋白可占细菌周质总蛋白的66.6%.该表达带可被抗Hp的特异抗体所识别.结论:幽门螺杆菌hspA基因的克隆与表达为Hp疫苗的研制打下了基础.
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