柱前衍生化-反相高效液相色谱法测定蛋白粉中氨基酸的含量

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目的:建立柱前衍生化-反相高效液相色谱方法测定蛋白粉中氨基酸的含量。方法:用6 mol/L HCl水解提取蛋白粉中总氨基酸,以异硫氰酸苯酯(PITC)为柱前衍生化试剂,采用外标法,梯度洗脱的方式分析。色谱柱为ODS(Kromasil 100-5 C18250×4.6 mm),采用两种流动相进行梯度洗脱:流动相A为0.1 mol/L醋酸钠缓冲液(pH6.5)-乙腈(97:3);流动相B为水-乙腈(1:4),使用紫外检测器,检测波长为254 nm。结果:17种氨基酸在40 min内均可得到很好的分离
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