金银花苯丙氨酸解氨酶(LJPAL1)抗体制备及酶联免疫吸附分析

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本文基于已有工作基础,选择与金银花活性成分积累密切相关的苯丙氨酸解氨酶基因LJPAL1构建原核表达载体,并在大肠杆菌中进行诱导表达;利用3个抗原位点分别合成多肽抗原,并制备多克隆抗体AntiLJT-1、Anti-LJT-2和Anti-LJT-3;利用蛋白质印迹法筛选抗体Anti-LJT-2,初步建立了间接法ELISA。本研究结果为进一步开展金银花化学质量快速评价试剂盒研究奠定基础。 Based on the existing work foundation, we chose the L-phenylalanine ammonia-lyase gene LJPAL1, which is closely related to the accumulation of active components of honeysuckle, and constructed the prokaryotic expression vector. The prokaryotic expression vector was induced in E.coli. Three antigenic sites were used to synthesize the polypeptide antigen, Anti-LJT-1, Anti-LJT-2 and Anti-LJT-3 were prepared. Anti-LJT-2 antibody was screened by Western blotting, and indirect ELISA was established. The results of this study lay the foundation for further research on the rapid evaluation kit of honeysuckle chemical quality.
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