【摘 要】
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为建立一种检测传染性肌肉坏死病毒的荧光定量RT-PCR方法,利用GenBank中收录的该病毒的全基因序列,设计特异性的引物与TaqMan探针,并构建包含目的序列的质粒作为标准品,经过
【机 构】
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成都海关技术中心,四川大学华西医学院
【基金项目】
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成都海关科技项目(SK201702).
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为建立一种检测传染性肌肉坏死病毒的荧光定量RT-PCR方法,利用GenBank中收录的该病毒的全基因序列,设计特异性的引物与TaqMan探针,并构建包含目的序列的质粒作为标准品,经过优化反应参数建立检测传染性肌肉坏死病毒的荧光定量RT-PCR方法。结果显示,建立的方法特异性良好,对其他8种病毒核酸无扩增,扩增总时长90min。该方法的灵敏度达到220copies/μL。重复性好,批内变异系数为0.3%~0.7%。外标法定量所需的标准曲线方程为y=﹣3.404x+37.21,相关系数R2=0.997,扩增效
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