【摘 要】
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目的 观察自噬和凋亡在胰岛素对人食管鳞癌细胞化疗增敏中的作用.方法 以140 mg/L顺铂作用于食管鳞癌EC9706细胞,噻唑蓝(MTT)法检测细胞活力,探寻活细胞数量达到平台期的时间T1(24 h),加入10 mU/ml胰岛素继续培养,6h后活细胞数再次达到T2平台期.分别收集T1、T2平台期细胞,膜联蛋白V-异硫氰酸荧光素(Annexin V-FITC)和单丹磺酰戊二胺(MDC)染色后,荧光显
【机 构】
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450052郑州大学第一附属医院胸外科河南省高等学校临床医学重点学科开放实验室郑州大学肿瘤分子外科研究所郑州市胸部肿瘤重点实验室,450052郑州大学第一附属医院胸外科河南省高等学校临床医学重点学科开
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目的 观察自噬和凋亡在胰岛素对人食管鳞癌细胞化疗增敏中的作用.方法 以140 mg/L顺铂作用于食管鳞癌EC9706细胞,噻唑蓝(MTT)法检测细胞活力,探寻活细胞数量达到平台期的时间T1(24 h),加入10 mU/ml胰岛素继续培养,6h后活细胞数再次达到T2平台期.分别收集T1、T2平台期细胞,膜联蛋白V-异硫氰酸荧光素(Annexin V-FITC)和单丹磺酰戊二胺(MDC)染色后,荧光显微镜下定性观察荧光;流式细胞术定量检测细胞凋亡、测定MDC荧光强度;Westernblot检测自噬相关蛋白Beclin-1的表达.结果 (1)T1平台期细胞凋亡率为(32.6±4.3)％,低于T2平台期的(47.5±5.6)％,差异有统计学意义(P＜0.05),但T1平台期细胞MDC平均荧光强度为104.9±13.2,明显高于T2平台期的82.6±10.3,差异有统计学意义(P＜0.05).(2)加入胰岛素后Beclin-1的表达显著下调,对照组、T1平台期、T2平台期的相对灰度值分别为0.151±0.053、0.657±0.050、0.453±0.032,任意两组之间差异均有统计学意义(P＜0.01).结论 通过抑制自噬,增加细胞凋亡,胰岛素提高了食管鳞癌细胞对顺铂的敏感性。
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