反义VEGF165腺病毒重组体的构建及鉴定

• 作 者: 王家宁 黄永章 王俊峰 王卫民 李瑞明 张群林
• 机 构: 郧阳医学院附属太和医院生命科学研究所
• 出 处: 郧阳医学院学报
• 发表日期: 2001年1期
• 关键词: 反义VEGF165 腺病毒 反义血管内皮生长因子165 基因重组 治疗 肿瘤 endothelial growth factorsadenovirusRNA a

目的：构建含人反义血管内皮生长因子165(VEGF165)基因的重组腺病毒载体，为采用反义VEGF165RNA防治肿瘤的研究奠定基础。方法：将人VEGF165 cDNA反向插入到穿梭质粒pHCMVSP1A的CMV启动子之下，即pAd-ahVEGF165。后者与pJM17通过脂质体共转染293细胞，经同源重组获得含人反义VEGF165基因的重组腺病毒Ad-ahVEGF165。通过PCR共扩增法鉴别Ad-ahVEGF165的正确与否。根据260nm的紫外光吸收值计算病毒滴度。结果：VEGF165 cDNA成功