微小RNA-19b在胰腺导管腺癌增殖及转移中的作用

• 作 者: 胡明星 付强 张旭 禹鹏飞 秦涛
• 机 构: 450003 郑州大学人民医院 河南省人民医院肝胆胰腺外科,450003 郑州大学人民医院 河南省人民医院肝胆胰腺外科,450003 郑州大学人民医院 河南省人民医院肝胆胰腺外科,450003 郑州大
• 出 处: 中华实验外科杂志
• 发表日期: 2018年35期
• 关键词: 微小RNA-19b 胰腺导管腺癌 转移 增殖

目的

检测微小RNA(miRNA，miR)-19b在胰腺导管腺癌(PDAC)细胞株中的表达量，探讨miR-19b在PDAC细胞增殖、迁移及侵袭中的作用。

方法

通过实时定量反转录聚合酶链反应(RT-qPCR)检测人胰腺导管正常上皮细胞HPDE、人PDAC细胞株PANC1、MiaPaCa2、BxPC3及人PDAC转移细胞株COLO357、FG中miR-19b的表达水平；构建miR-19b稳定高表达及低表达细胞株。通过Transwell小室细胞迁移实验和Matrigel细胞侵袭实验验证miR-19b沉默和高表达的PDAC细胞迁移和侵袭能力改变；通过噻唑蓝(MTT)实验和克隆形成实验检测miR-19b沉默及高表达后PDAC细胞增殖能力的变化，并通过Western blot进一步检测PDAC细胞增殖标志物p21及p27在miR-19b沉默及高表达后表达量改变。

结果

RT-qPCR检测结果显示与人胰腺导管正常上皮细胞HPDE中miR-19b表达量(98.21±14.54)比较，人PDAC细胞株PANC1、MiaPaCa2、BxPC3及转移细胞株COLO357、FG中miR-19b的表达量(198.45±21.22、221.37±18.59、182.51±13.48、317.64±15.20、331.34±17.18)明显升高(P＝0.003、0.005、0.021、0.001、0.001)，差异有统计学意义；Transwell小室细胞迁移实验和Matrigel细胞侵袭实验显示miR-19b沉默后FG细胞的迁移和侵袭能力[(22.54±2.87)%、(28.87±5.62)%]与对照组[(99.65±3.07)%、(98.73±4.38)%]比较明显下降(P＝0.005、0.002)，差异有统计学意义；相反BxPC3细胞过表达miR-19b的细胞的迁移和侵袭能力[(317.53±10.21)%、(286.77±12.83)%]与对照组[(97.89±5.31)%、(98.25±7.57)%]比较明显升高(P＝0.003、0.007)，差异有统计学意义；克隆形成实验和MTT实验检测发现miR-19b沉默后PDAC细胞增殖能力与对照组比较明显降低(P＝0.003、0.005)，差异有统计学意义，miR-19b过表达后PDAC细胞增殖能力与对照组比较明显增强(P＝0.002、0.007)，差异有统计学意义；Western blot结果显示miR-19b沉默后PDAC细胞增殖标志物p21及p27表达量与对照组比较升高(3.25±0.27、5.38±0.33)倍(P＝0.003、0.001)，差异有统计学意义；miR-19b高表达后p21及p27表达量与对照组比较下降(2.68±0.15、3.27±0.27)倍(P＝0.006、0.005)，差异有统计学意义。

结论

miR-19b可促进PDAC细胞迁移和侵袭，可增强PDAC细胞增殖能力。