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【摘要】 目的：通过对鼻咽癌高发区大样本人群鼻咽癌筛查两种抗体水平分析，为鼻咽癌高发区的防治策略提供科学依据。方法：应用ELISA法检测EBNA1-IgA和EBVCA-IgA抗体，对两种EB病毒抗在性别、年龄的阳性率和可疑阳性率的分布特征进行研究。结果：筛查人群EBNA1-IgA抗体阳性率和可疑阳性率分别为9.27%（778/8395）、12.54%（1053/8395），EBVCA-IgA抗体阳性率和可疑阳性率分别为11.79%（990/8395）、13.60%（1142/8395）。男性EBNA1-IgA抗体阳性率为10.53%，高于女性的8.01%，差异有统计学意义（P<0.05）；男、女性EBVCA-IgA抗体阳性率分别为11.77%和11.82%，两组比较差异无统计学意义（P>0.05）。结论：EBNA1-IgA抗体（45～60岁年龄段）分布男性高于女性。VCA-IgA抗体阳性率无显著差异，筛查人群的EBNA1-IgA和VCA/IgA抗体阳性率和可疑阳性率随着年龄增长逐渐上升。提示须加强对此年龄段人群的EB病毒感染的定期筛查，可提高鼻咽癌的早诊率。
【关键词】 鼻咽癌筛查； EB病毒抗体； rOD值
【Abstract】 Objective：To analyze the high incidence large population-based screening nasopharyngeal carcinoma （NPC） two kinds of antibody level，to provide scientific basis for prevention and control of high incidence of nasopharyngeal carcinoma strategies.Method：EBNA1 IgA and EBVCA IgA antibodies were detected by ELISA method，resistance of two kinds of EB virus in gender，age，the positive rate and the distribution features of the suspicious positive rate were studied.Result：The positive rate of screening population EBNA1-IgA antibody positive rates were 9.27%（778/8395），12.54%（1053/8395），EBVCA-IgA antibody positive rate and the positive rate was 11.79% suspicious（990/8395），13.60%（1142/8395） respectively.Men EBNA1-IgA antibody positive rate was 10.53%，it was significantly higher than 8.01% of women，the difference was statistically significant（P<0.05）；Male and female EBVCA-IgA antibody positive rate were 11.77% and 11.82% respectively，the difference was no statistically significant（P>0.05）.Conclusion：EBNA1-IgA antibodies（45-60 years of age） distribution in men than women.VCA-IgA antibody positive rate is no significant difference，the results show that people EBNA1/IgA and VCA/IgA antibody positive rate and suspicious positive rate increase with age.Tip must strengthen this ages of regular screening of EB virus infection，can improve the rate of early detection of nasopharyngeal carcinoma.
【Key words】 Screening for nasopharyngeal carcinoma； EB virus antibody； rOD value
First-author’s address：Xiaolan People’s Hospital of Zhongshan City，Zhongshan 528415，China
doi：10.3969/j.issn.1674-4985.2014.20.030
EB病毒因与鼻咽癌的发生与发展密切相关而日益受到重视，EB病毒存在于大部分人体内，多数无症状，人体感染EB病毒后，会因病毒感染状态不同产生不同的抗体，因此检测血液中的多种抗体能更好地反应EB病毒的感染状态[1-3]。中山市位于广东省中南部西江流域，是广东省鼻咽癌高发区，本研究在鼻咽癌高发区小榄镇进行鼻咽癌筛查，联合检测EB病毒VCA-IgA和NA1-IgA抗体在性别、年龄的rOD值水平及分布特征进行研究，现报告如下。
1 资料与方法
1.1 一般资料 筛查人群来自鼻咽癌高发区广东省中山市小榄镇30～59岁健康居民，自愿参加鼻咽癌筛查8395例，均签署筛查知情同意书，所有被筛查人群根据rOD值来判断两种抗体的阳性及可疑阳性的例数，按性别、年龄进行分组。年龄按照5岁的间隔进行分组，将人群各分为五组。 1.2 仪器与试剂 （1）仪器：美国伯腾EX808酶标仪、EX50洗板机；（2）试剂：检测EBNA1-IgA由中山生物工程有限公司提供，EBVCA-IgA的试剂盒由欧蒙公司提供
1.3 方法 采集筛查人群血清标本，严格按试剂盒的说明书操作，血清抗体水平用相对吸光度值（rOD）表示，即样本吸光度值（A）除以两份质控血清的平均吸光度值。结果判断根据试剂说明书要求，EBVCA-IgA抗体判断以rOD值在0.8～1.1之间为可疑阳性，rOD值在≥1.1为阳性；EBNA1-IgA抗体判断以rOD值在0.7～1.5之间为可疑阳性，rOD值在≥1.5为阳性；并对筛查人群两种抗体的阳性率与可疑阳性率进行统计分析。
1.4 统计学处理 采用SPSS 16.0软件对所得数据进行统计分析，计数资料采用 字2检验，以P<0.05为差异有统计学意义。
2 结果
2.1 筛选人群各年龄EB病毒抗体阳性率的比较 男性EBNA1-IgA抗体阳性率为10.53%，高于女性的8.01%，差异有统计学意义（P<0.05）；男、女性EBVCA-IgA抗体阳性率分别为11.77%和11.82%，两组比较差异无统计学意义（P>0.05）。EBNA1-IgA抗体阳性率在30～45岁年龄段显示无性别差异，但45岁以上年龄段（45～60岁）男性较女性感染率高。EBVCA-IgA抗体阳性率各年龄段男、女差异均无统计学意义（P>0.05），见表1。
2.2 筛选人群各年龄EB病毒抗体可疑阳性率的比较 男、女性别组的两种EB病毒抗体可疑阳性率差异均无统计学意义（P>0.05）。EBNA1-IgA阳性率在30～40岁年龄段显示无性别差异，但40岁以上年龄段（40～60岁）男性略高于女性，见表2。
3 讨论
EB病毒是1964年Epstein和Barr最先用电镜发现的一种疱疹病毒，为疱疹病毒科r疱疹病毒亚科、淋巴隐病毒属，又称人类疱疹病毒，其本结构包括核样物、衣壳和囊膜三部分，EB病毒其仅能在B淋巴细胞中增殖，被病毒感染的细胞具有EBV的基因组，并可产生多种抗原，如EB核抗原、早期抗原、膜抗原、衣壳抗原等，感染者可产生相应的EB病毒抗体，如核抗体、早期抗体、膜抗体、衣壳抗体IgG和IgA[4-6]。EB病毒因与鼻咽癌的发生与发展密切相关而日益受到重视，EB病毒存在于大部分人体内，多数无症状，人体感染EB病毒后，会因病毒感染状态不同产生不同的抗体，因此检测血液中的多种抗体能更好地反应EB病毒的感染状态。大量研究结果表明，EB病毒是鼻咽癌重要的诱发因子，并且在鼻咽癌患者体内经常存在升高的EB病毒不同抗原的特异性抗体，长期以来，EB病毒的血清学检测被作为鼻咽癌筛查及早期诊断的手段广泛使用[7-10]。
由于中山是鼻咽癌高发区，目前已制定并实行了鼻咽癌筛查的标准方案，对30～60岁当地居民采用头颈部检查及检测EBVCA-IgA和EBNA1-IgA抗体作为初筛手段。本研究共收集中山市小榄镇2013年鼻咽癌筛查人群8395例，结果中发现：筛查人群EBNA1-IgA抗体阳性率和可疑阳性率分别为9.27%（778/8395）、12.54%（1053/8395），EBVCA-IgA抗体阳性率和可疑阳性率分别为11.79%（990/8395）、13.60%（1142/8395）。男性EBNA1-IgA抗体阳性率为10.53%，高于女性的8.01%，差异有统计学意义（P<0.05），男、女性EBVCA-IgA抗体阳性率分别为11.77%和11.82%，两组比较差异无统计学意义（P>0.05）；结果与邓洪等[11]和程伟民等[12]研究EBNA1-IgA抗体浓度在人群中分布较为离散，但男女间没有差异的结果有区别，这可能与调查人群、样本量不同有关，与俞霞等[13]和Tian等[14]研究结果显示的男性EBNA1-IgA抗体阳性率高于女性相吻合。从流行病学调查角度分析EBNA1-IgA抗体分布上的差异，阳性率和可疑阳性率男性都高于女性，符合男性鼻咽癌发病率高于女性的相关报道[15-16]。本研究结还显示，在EBNA1-IgA抗体阳性率和可疑阳性率上，45岁以上年龄段（40～60岁）男性均高于女性。笔者发现男性EBNA1-IgA和VCA-IgA抗体阳性率随着年龄的增加呈上升趋势，EB病毒抗体阳性者年龄分布集中于45～60岁年龄段，抗体阳性率高峰年龄段与鼻咽癌发病高峰年龄段基本一致[17-19]。
有报道称，ELISA法检测EBNA1-IgA和EBVCA-IgA抗体的敏感度为95.29%，特异度为94.07%，联合检测可大大提高阳性率[20]。本研究从抗体阳性率随年龄变化的角度分析，EBNA1-IgA抗体有望成为鼻咽癌筛查的一个理想指标。与研究报道EBNA1-IgA抗体具有较高的灵敏度和特异度相符[21-22]。由以上研究可见，中老年人患EB病毒感染的几率较高，男性较女性更容易感染EB病毒[23]。本研究还发现筛查人群中可疑阳性率比阳性率还高，值得关注，在实际工作中更应加强对此年龄段人群EB病毒感染的定期筛查及干预治疗，可提高鼻咽癌的早期诊断、早期治疗率，进而为防治鼻咽癌起到积极作用，达到鼻咽癌筛查的目的。
参考文献
[1] Cao S M，Simons M J，Qian C N.The prevalence and prevention of nasopharyngeal carcinoma in China[J].Chin J Cancer，2011，30（2）：114-119.
[2]柳青，黄启洪，廖建，等.广东四会市和广西苍梧县鼻咽癌筛查筛查结果分析[J].中华预防医学杂志，2011，45（7）：664-665.
[3]沈亚华，季明芳.鼻咽癌高发区12 991名健康成人鼻咽癌风险评估结果分析[J].实用医学杂志，2011，27（5）：882-883. [4]王兰兰.临床免疫学和免疫检验[M].北京：人民卫生出版社，2002：49-51.
[5] Yu K J，Hsu W L，Pfeiffer R M，et al.Prognostic utility of anti-EBV antibody testing for defining NPC risk among individuals from high-risk NPC families[J].Clin Cancer Res，2011，17（7）：1906-1914.
[6] Wang H M，Chen J，Zeng M H，et al.The intracellular form Epstein-Barr virus genome in nasopharyngeal carcinoma[J].Chinese Journal of Cancer Research，1998，10（1）：27.
[7]付亚峰，崔德威.鼻咽癌标志物的研究现状[J].现代肿瘤医学，2007，15（1）：139-140.
[8]程敏婷，程伟民，季明芳，等.ELISA法检测中国中山市正常人及鼻咽癌患者血清EB病毒抗体水平[J].第一军医大学学报，2002，22（9）：817-818.
[9]贾宁人，曹华，陈亚军，等.血清抗EB病毒抗体检测及其临床应用评价[J].临床检验杂志，2009，27（2）：139.
[10]周鹰，朱洪.血清EB病毒抗体检测对鼻咽癌的临床诊断价值[J].第四军医大学学报，2009，30（12）：1102.
[11]邓洪，曾毅，郑裕明，等.自然人群413 164人鼻咽癌血清学普查[J].中国癌症杂志，2003，13（2）：109-111.
[12]程伟民，季明芳，宗永生，等.血清EB病毒抗体EBNA1 IgA检测临界值探讨[J].中国肿瘤临床，2005，32（11）：638-640.
[13]喻霞，季明芳，余元龙，等.鼻咽癌高发区居民EB病毒感染流行病学研究[J].中国肿瘤临床，2011，38（24）：1151-1154.
[14] Tian W，Zeng X M，Li L X，et al.Gender-specific associations between MICA-STR and nasopharyngeal carcinoma in a southern Chinese Han population[J].Immunogenetics，2006，58（2-3）：113-121.
[15] Lee A W，Foo W，Mang O，et al.Changing epidemiology of nasopharyngeal carcinoma in Hong Kong over a 20-year period （1980-99）：an encouraging reduction in both incidence and mortality[J].Int J Cancer，2003，103（5）：680-685.
[16]唐国全，周向阳，阳茂春.EB病毒IgA滴度在鼻咽癌诊断的敏感性和特异性[J].广西医学，2008，30（6）：831-832.
[17] Cao S M，Liu Z，Jia W H，et al.Fluctuations of epstein-barr virus serological antibodies and risk for nasopharyngeal carcinoma：a prospective screening study with a 20-year follow-up[J].Plos One，2011，6（4）：e19 100.
[18]潘桂常，黄岩，潘辉林，等.EB病毒VCA-IgA在鼻咽癌筛查中的临床意义[J].实用预防医学，2011，18（12）：2396-2397.
[19]李艳华，黄启洪.EB病毒抗体与鼻咽癌发病风险的前瞻性研究[J].中国肿瘤，2012，21（9）：670-672.
[20]王盼盼.鼻咽癌血清学筛查研究进展[J].肿瘤研究与临床，2013，25（8）：572-574.
[21]季明芳，郭媛卿，梁锦胜，等.鼻咽癌患者发病前后EB病毒VCA/IgA和EA/IgA滴度动态分析[J].中华肿瘤杂志，2003，25（3）：243-245.
[22]陈静平，龙军，张宏征，等.EB病毒壳抗原抗体定性检测在鼻咽癌筛查中的作用[J].南方医科大学学报，2011，（9）：1637-1638.
[23]邓兆享.血清中EBNA1-IgA和EBVCA-IgA检测对鼻咽癌的诊断价值[J].中国热带医学，2009，9（9）：1718.
（收稿日期：2014-03-26） （本文编辑：欧丽）
【关键词】 鼻咽癌筛查； EB病毒抗体； rOD值
【Abstract】 Objective：To analyze the high incidence large population-based screening nasopharyngeal carcinoma （NPC） two kinds of antibody level，to provide scientific basis for prevention and control of high incidence of nasopharyngeal carcinoma strategies.Method：EBNA1 IgA and EBVCA IgA antibodies were detected by ELISA method，resistance of two kinds of EB virus in gender，age，the positive rate and the distribution features of the suspicious positive rate were studied.Result：The positive rate of screening population EBNA1-IgA antibody positive rates were 9.27%（778/8395），12.54%（1053/8395），EBVCA-IgA antibody positive rate and the positive rate was 11.79% suspicious（990/8395），13.60%（1142/8395） respectively.Men EBNA1-IgA antibody positive rate was 10.53%，it was significantly higher than 8.01% of women，the difference was statistically significant（P<0.05）；Male and female EBVCA-IgA antibody positive rate were 11.77% and 11.82% respectively，the difference was no statistically significant（P>0.05）.Conclusion：EBNA1-IgA antibodies（45-60 years of age） distribution in men than women.VCA-IgA antibody positive rate is no significant difference，the results show that people EBNA1/IgA and VCA/IgA antibody positive rate and suspicious positive rate increase with age.Tip must strengthen this ages of regular screening of EB virus infection，can improve the rate of early detection of nasopharyngeal carcinoma.
【Key words】 Screening for nasopharyngeal carcinoma； EB virus antibody； rOD value
First-author’s address：Xiaolan People’s Hospital of Zhongshan City，Zhongshan 528415，China
doi：10.3969/j.issn.1674-4985.2014.20.030
EB病毒因与鼻咽癌的发生与发展密切相关而日益受到重视，EB病毒存在于大部分人体内，多数无症状，人体感染EB病毒后，会因病毒感染状态不同产生不同的抗体，因此检测血液中的多种抗体能更好地反应EB病毒的感染状态[1-3]。中山市位于广东省中南部西江流域，是广东省鼻咽癌高发区，本研究在鼻咽癌高发区小榄镇进行鼻咽癌筛查，联合检测EB病毒VCA-IgA和NA1-IgA抗体在性别、年龄的rOD值水平及分布特征进行研究，现报告如下。
1 资料与方法
1.1 一般资料 筛查人群来自鼻咽癌高发区广东省中山市小榄镇30～59岁健康居民，自愿参加鼻咽癌筛查8395例，均签署筛查知情同意书，所有被筛查人群根据rOD值来判断两种抗体的阳性及可疑阳性的例数，按性别、年龄进行分组。年龄按照5岁的间隔进行分组，将人群各分为五组。 1.2 仪器与试剂 （1）仪器：美国伯腾EX808酶标仪、EX50洗板机；（2）试剂：检测EBNA1-IgA由中山生物工程有限公司提供，EBVCA-IgA的试剂盒由欧蒙公司提供
1.3 方法 采集筛查人群血清标本，严格按试剂盒的说明书操作，血清抗体水平用相对吸光度值（rOD）表示，即样本吸光度值（A）除以两份质控血清的平均吸光度值。结果判断根据试剂说明书要求，EBVCA-IgA抗体判断以rOD值在0.8～1.1之间为可疑阳性，rOD值在≥1.1为阳性；EBNA1-IgA抗体判断以rOD值在0.7～1.5之间为可疑阳性，rOD值在≥1.5为阳性；并对筛查人群两种抗体的阳性率与可疑阳性率进行统计分析。
1.4 统计学处理 采用SPSS 16.0软件对所得数据进行统计分析，计数资料采用 字2检验，以P<0.05为差异有统计学意义。
2 结果
2.1 筛选人群各年龄EB病毒抗体阳性率的比较 男性EBNA1-IgA抗体阳性率为10.53%，高于女性的8.01%，差异有统计学意义（P<0.05）；男、女性EBVCA-IgA抗体阳性率分别为11.77%和11.82%，两组比较差异无统计学意义（P>0.05）。EBNA1-IgA抗体阳性率在30～45岁年龄段显示无性别差异，但45岁以上年龄段（45～60岁）男性较女性感染率高。EBVCA-IgA抗体阳性率各年龄段男、女差异均无统计学意义（P>0.05），见表1。
2.2 筛选人群各年龄EB病毒抗体可疑阳性率的比较 男、女性别组的两种EB病毒抗体可疑阳性率差异均无统计学意义（P>0.05）。EBNA1-IgA阳性率在30～40岁年龄段显示无性别差异，但40岁以上年龄段（40～60岁）男性略高于女性，见表2。
3 讨论
EB病毒是1964年Epstein和Barr最先用电镜发现的一种疱疹病毒，为疱疹病毒科r疱疹病毒亚科、淋巴隐病毒属，又称人类疱疹病毒，其本结构包括核样物、衣壳和囊膜三部分，EB病毒其仅能在B淋巴细胞中增殖，被病毒感染的细胞具有EBV的基因组，并可产生多种抗原，如EB核抗原、早期抗原、膜抗原、衣壳抗原等，感染者可产生相应的EB病毒抗体，如核抗体、早期抗体、膜抗体、衣壳抗体IgG和IgA[4-6]。EB病毒因与鼻咽癌的发生与发展密切相关而日益受到重视，EB病毒存在于大部分人体内，多数无症状，人体感染EB病毒后，会因病毒感染状态不同产生不同的抗体，因此检测血液中的多种抗体能更好地反应EB病毒的感染状态。大量研究结果表明，EB病毒是鼻咽癌重要的诱发因子，并且在鼻咽癌患者体内经常存在升高的EB病毒不同抗原的特异性抗体，长期以来，EB病毒的血清学检测被作为鼻咽癌筛查及早期诊断的手段广泛使用[7-10]。
由于中山是鼻咽癌高发区，目前已制定并实行了鼻咽癌筛查的标准方案，对30～60岁当地居民采用头颈部检查及检测EBVCA-IgA和EBNA1-IgA抗体作为初筛手段。本研究共收集中山市小榄镇2013年鼻咽癌筛查人群8395例，结果中发现：筛查人群EBNA1-IgA抗体阳性率和可疑阳性率分别为9.27%（778/8395）、12.54%（1053/8395），EBVCA-IgA抗体阳性率和可疑阳性率分别为11.79%（990/8395）、13.60%（1142/8395）。男性EBNA1-IgA抗体阳性率为10.53%，高于女性的8.01%，差异有统计学意义（P<0.05），男、女性EBVCA-IgA抗体阳性率分别为11.77%和11.82%，两组比较差异无统计学意义（P>0.05）；结果与邓洪等[11]和程伟民等[12]研究EBNA1-IgA抗体浓度在人群中分布较为离散，但男女间没有差异的结果有区别，这可能与调查人群、样本量不同有关，与俞霞等[13]和Tian等[14]研究结果显示的男性EBNA1-IgA抗体阳性率高于女性相吻合。从流行病学调查角度分析EBNA1-IgA抗体分布上的差异，阳性率和可疑阳性率男性都高于女性，符合男性鼻咽癌发病率高于女性的相关报道[15-16]。本研究结还显示，在EBNA1-IgA抗体阳性率和可疑阳性率上，45岁以上年龄段（40～60岁）男性均高于女性。笔者发现男性EBNA1-IgA和VCA-IgA抗体阳性率随着年龄的增加呈上升趋势，EB病毒抗体阳性者年龄分布集中于45～60岁年龄段，抗体阳性率高峰年龄段与鼻咽癌发病高峰年龄段基本一致[17-19]。
有报道称，ELISA法检测EBNA1-IgA和EBVCA-IgA抗体的敏感度为95.29%，特异度为94.07%，联合检测可大大提高阳性率[20]。本研究从抗体阳性率随年龄变化的角度分析，EBNA1-IgA抗体有望成为鼻咽癌筛查的一个理想指标。与研究报道EBNA1-IgA抗体具有较高的灵敏度和特异度相符[21-22]。由以上研究可见，中老年人患EB病毒感染的几率较高，男性较女性更容易感染EB病毒[23]。本研究还发现筛查人群中可疑阳性率比阳性率还高，值得关注，在实际工作中更应加强对此年龄段人群EB病毒感染的定期筛查及干预治疗，可提高鼻咽癌的早期诊断、早期治疗率，进而为防治鼻咽癌起到积极作用，达到鼻咽癌筛查的目的。
参考文献
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[12]程伟民，季明芳，宗永生，等.血清EB病毒抗体EBNA1 IgA检测临界值探讨[J].中国肿瘤临床，2005，32（11）：638-640.
[13]喻霞，季明芳，余元龙，等.鼻咽癌高发区居民EB病毒感染流行病学研究[J].中国肿瘤临床，2011，38（24）：1151-1154.
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[16]唐国全，周向阳，阳茂春.EB病毒IgA滴度在鼻咽癌诊断的敏感性和特异性[J].广西医学，2008，30（6）：831-832.
[17] Cao S M，Liu Z，Jia W H，et al.Fluctuations of epstein-barr virus serological antibodies and risk for nasopharyngeal carcinoma：a prospective screening study with a 20-year follow-up[J].Plos One，2011，6（4）：e19 100.
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[21]季明芳，郭媛卿，梁锦胜，等.鼻咽癌患者发病前后EB病毒VCA/IgA和EA/IgA滴度动态分析[J].中华肿瘤杂志，2003，25（3）：243-245.
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[23]邓兆享.血清中EBNA1-IgA和EBVCA-IgA检测对鼻咽癌的诊断价值[J].中国热带医学，2009，9（9）：1718.
（收稿日期：2014-03-26） （本文编辑：欧丽）