【摘 要】
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采用RT-PCR技术获得了拟南芥多聚ADP核糖聚合酶[poly(ADP-ribose) polymerase,PARP]PARP1基因的全长cDNA,转入原核表达载体pET32a并转化宿主菌Origami(DE3),加入终浓度为0.3 mmol
【基金项目】
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国家自然科学基金(31070232,31170169)
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采用RT-PCR技术获得了拟南芥多聚ADP核糖聚合酶[poly(ADP-ribose) polymerase,PARP]PARP1基因的全长cDNA,转入原核表达载体pET32a并转化宿主菌Origami(DE3),加入终浓度为0.3 mmol/L IPTG,在16 ℃下诱导可获得较多的可溶重组蛋白。纯化TRX-PARP1,在反应液中加入NAD+和断裂DNA,通过SDS-PAGE凝胶电泳和Western blotting分析,TRX-PARP1分子量可随着时间的延长逐渐增大,产生向上的弥散,表明蛋白质连上
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