肺癌细胞A549抗原相关旋毛虫Tsp06172基因的克隆及原核表达

• 作 者: 高江明 徐晓芳 吕萌 左绍志 宫鹏涛 杨举 李赫 李建华 张国才
• 机 构: 吉林大学畜牧兽医学院,吉林长春,130062
• 出 处: 中国病原生物学杂志
• 发表日期: 2013年3期
• 关键词: 旋毛虫 Tsp06172基因 原核表达 肺癌细胞A549

目的 克隆旋毛虫(Trichinella spiralis)与肺癌细胞A549相关抗原Tsp06172基因,并进行原核表达. 方法 采用RT-PCR方法扩增Tsp06172基因,连接原核表达载体pET-28a,转化入感受态细胞BL21,IPTG诱导表达,经SDS-PAGE和Western blot鉴定表达产物. 结果 重组表达质粒经双酶切及测序鉴定正确.表达分子质量单位约为16 ku的融合蛋白.Western blot检测融合蛋白能被抗A549细胞的多克隆抗体识别. 结论 构建的原核表达载体pET-28a Tsp06172表达具有A549细胞反应原性的蛋白,为旋毛虫Tsp06172重组蛋白功能的研究了奠定基础.