【摘 要】
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目的观察微小RNA-21(miRNA-21)反义寡核苷酸对食管癌EC9706顺铂(DDP)耐药细胞(EC9706/DDP)的影响。方法设计miRNA-21反义寡核苷酸,建立EC9706/DDP耐药细胞株并转染耐药细胞,实时荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)检测各组细胞miRNA-21表达水平,噻唑蓝(MTT)法检测各组细胞对DDP药物敏感性、克隆形成实验检测各组细胞增殖能力,流式细胞术检测细胞凋
【机 构】
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450052郑州大学护理学院,郑州大学第一附属医院胸外科
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目的观察微小RNA-21(miRNA-21)反义寡核苷酸对食管癌EC9706顺铂(DDP)耐药细胞(EC9706/DDP)的影响。
方法设计miRNA-21反义寡核苷酸,建立EC9706/DDP耐药细胞株并转染耐药细胞,实时荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)检测各组细胞miRNA-21表达水平,噻唑蓝(MTT)法检测各组细胞对DDP药物敏感性、克隆形成实验检测各组细胞增殖能力,流式细胞术检测细胞凋亡变化,Western blot检测B细胞淋巴瘤/白血病-2(bcl-2)、B细胞淋巴瘤/白血病-2相关X蛋白(bax)蛋白表达。
结果与空白组、miRNA-阴性对照(NC)比较,miRNA-21反义寡核苷酸组miRNA-21相对表达量下降为0.21±0.89、半数抑制剂量(IC50)明显降低为(16.22±1.85)mg/L、克隆集落的数量较少、细胞凋亡率明显增高为(30.5±2.9)%、bcl-2蛋白表达水平降低,bax蛋白表达水平增高,差异均有统计学意义(P< 0.05)。
结论miRNA-21可能通过降低bcl-2、增高bax蛋白表达水平降低EC9706/DDP细胞对DDP的耐药性。
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