Clostridium paraputrificum M—21 β—N—乙酰氨基葡萄糖苷酶的表达、纯化与性质

• 作 者: 李华钟 王树英 森本兼司 大宫邦雄
• 机 构: 江南大学,江南大学,三重大学生物资源学部
• 出 处: 无锡轻工大学学报：食品与生物技术
• 发表日期: 2003年3期
• 关键词: β-N-乙酰氨基葡萄糖苷酶 基因表达 纯化 几丁质酶 产酶基因 酶学性质 β-N-Acetylglucosaminidase Clostridium parap
• 基金项目: 日本文部科学省大学校科研和教改项目

以Clostridium paraputrificum M21染色体DNA为模板,经PCR扩增获得编码β-N-乙酰氨基葡萄糖苷酶的基因nag3A,与质粒pQE30T所构建的表达质粒pNAG3A在Escherichia coli M15中表达良好.从重组E.coli M15中纯化得到的Nag3A以4-MU-GlcNAc为底物时,最适作用温度和最适作用pH分别为50 ℃和7.0;在30 ℃以下和pH 6～9之间该酶活性稳定.对4-MU-GlcNAc的Km和Vmax分别为7.9 μmol和21.8 μmol/(