烟草远缘杂种合子中父本特异表达基因EB30的克隆与分析

• 作 者: 罗岸
• 机 构: 长江大学生命科学学院
• 出 处: 生物技术通报
• 发表日期: 2015年1期
• 关键词: 烟草 远缘杂交 早期胚胎发生 父本特异表达 基因克隆 tobacco interspecies hybrid early embryogenesis pater

已知烟草远缘杂种的合子中EB30基因（EST序列号EB426694）的表达具有父本特异性。参考NCBI的EST序列设计引物，克隆得到该基因的CDS序列，并对其编码的蛋白进行生物信息学分析。使用染色体步移和hiTAIR-PCR技术获取EB30基因的5＇侧翼序列（启动子和5＇ UTR）。构建由该基因5＇侧翼序列驱动的EB30-EGFP融合蛋白表达载体并转化烟草。结果表明， EB30蛋白由211个氨基酸组成，蛋白分子量为22.6162 kD，等电点pI为5.63。该蛋白具有亲水性，可能定位于线粒体中。烟草EB3