胎儿毛乳头细胞的培养和鉴定及其体外诱导分化

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目的 探讨胎儿毛乳头细胞(dermal papilla cells,DPCs)生物学特性和体外诱导分化潜能,论证作为组织工程种子细胞的可行性.方法 Ⅰ型胶原酶消化法分离毛乳头,Eagle动物细胞培养基(DMEM)/F12(3∶1)中培养细胞,通过免疫荧光检测α平滑肌动蛋白(smooth muscle actin-α,SMA-α)、Ⅰ型胶原、Ⅱ型胶原、层粘连蛋白,对细胞的生物学特性进行鉴定.取第3、7代细胞以成脂诱导液、成骨诱导液体外定向诱导7~10 d,油红染色和Von Kossa染色、骨桥蛋白免疫荧光检测鉴定细胞的成脂和成骨特性.结果 体外培养的DPCs表达SMA-α、Ⅰ型胶原、Ⅳ型胶原和层粘连蛋白,成脂诱导10 d后油红染色可见细胞胞浆内红色脂滴形成,成骨诱导7d后Von Kossa染色细胞间有黑色钙结节形成,细胞表达骨桥蛋白.结论 体外培养DPCs具有干细胞特性,可作为皮肤组织工程和骨组织工程一种新的种子细胞。

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