【摘 要】
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目的克隆恶性疟原虫海南株 (FCC1/HN)子孢子表面蛋白 2( PfSSP2)基因,并进行序列分析.方法根据 PfSSP2基因已知序列设计合成一对引物 ,用 PCR技术从 FCC1/HN株基因组 DNA中扩
【机 构】
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中山大学中山医学院寄生虫学教研室,广州,510080
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目的克隆恶性疟原虫海南株 (FCC1/HN)子孢子表面蛋白 2( PfSSP2)基因,并进行序列分析.方法根据 PfSSP2基因已知序列设计合成一对引物 ,用 PCR技术从 FCC1/HN株基因组 DNA中扩增出 PfSSP2基因,并克隆入 pMD-18T测序载体.用双脱氧链末端终止法测序,用 DNAstar软件辅助分析基因结构及进行同源性比较.结果 PCR扩增得到特异的 FCC1/HN株 PfSSP2基因序列,酶切及 PCR鉴定获得了正确的 pT-PfSSP2重组质粒.测序表明,所克隆的 PfSSP2基因大小为 1680 bp,编码 559个氨基酸残基.序列分析表明,我国恶性疟原虫 FCC1/HN株与国外的 3D7、 DD2、 FCR3、 HB3A、 K1、 Thai814、 Thai838、 Thai842、 Thai947及 7G8株 PfSSP2的氨基酸序列在 33个位点存在氨基酸替代, 1处氨基酸序列增加;各株间 PfSSP2的氨基酸序列同源性都在 95.7%以上.结论克隆了恶性疟原虫 FCC1/HN株 PfSSP2基因.序列测定及同源性分析表明,恶性疟原虫不同分离株间有高度的同源性.
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