脂多糖刺激人牙髓干细胞分泌的外泌体联合基质细胞衍生因子-1对牙髓再生的影响

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目的

探讨轻度炎症状态下人牙髓干细胞(human dental pulp stem cell,hDPSC)产生的外泌体与基质细胞衍生因子-1(stromal cell-derived factor-1,SDF-1)联合应用对牙髓组织再生的影响。

方法

分离培养hDPSC,脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)刺激hDPSC,超速离心法提取hDPSC经LPS刺激后产生的外泌体(exosomes from lipopolysaccharide-stimulated hDPSC,L-EXO)和正常状态下分泌的外泌体(exosome from normal hDPSC,N-EXO),通过透射电镜和蛋白质印迹法鉴定提取物。将40只6~8 周龄的SD 大鼠通过随机数字表法分为S组(单独应用SDF-1)、L S组(SDF-1 与L-EXO 联合应用)、N S组(SDF-1与N-EXO联合应用)和空白对照组(根管内不植入任何物质),每组10只。以双侧下颌第一磨牙为实验牙,建立大鼠无髓根管模型,根据分组分别在根管内植入不同的内容物。植入后30 d过量麻醉处死所有大鼠,取大鼠双侧下颌骨组织,应用HE、Masson及免疫组织化学染色法进行组织学评价。

结果

HE染色结果显示,除空白对照组外,其他3组根管内均可见新生牙髓样组织,其中L S组根管内新生组织的量及组织中的细胞数量最多,S组最少。Masson染色结果显示,L S组矿化组织沿根管壁纵向排列,胶原纤维有序排列,N S组呈无规律紊乱分布。定量分析各组新生血管面积,结果显示L S组血管密度[(2.03±0.65)%]显著高于S组[(0.65±0.05)%]及N S组[(1.06±0.38)%](F=5.879,P

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