一种基于酶切的电化学检测序列特异性DNA结合蛋白的方法

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我们提出一种新型非标记蛋白质的电化学检测转录因子NF-κB的方法,即将固定在金电极上的通用寡核苷酸通过连接酶形成单分子发夹寡核苷酸,然后进行固相酶促延伸成双链寡核苷酸,最后通过Eco R的酶切信号的变化,采用阳极溶出法和循环伏安法结合纳米金催化银沉积法检测NF-κB。结果表明本方法具有高特异性、高灵敏度和快速等优点,为单核苷酸突变、药物筛选研究提供有力工具。 We propose a novel electrochemical detection of non-labeled protein transcription factor NF-κB method, that is, the universal oligonucleotide immobilized on the gold electrode by ligase to form a single molecule hairpin oligonucleotide, and then the enzyme Finally, the enzymatic cleavage signal of Eco R was used to detect NF-κB by anodic stripping and cyclic voltammetry combined with gold-catalyzed silver deposition. The results show that the method has the advantages of high specificity, high sensitivity and rapidity, and provides a powerful tool for single nucleotide mutation and drug screening research.
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