肝癌相关抗原SMP30重组基因的构建、表达及分子伴侣共表达系统的探索

• 作 者: 黄朋 范升龙 凌敏 贺菽嘉 周素芳
• 机 构: 广西医科大学生物化学与分子生物学教研室
• 出 处: 生物技术通报
• 发表日期: 2012年4期
• 关键词: SMP30 基因工程 表达与纯化 分子伴侣质粒 共表达 SMP30 Genetic engineering Expression and purificatio

旨在通过应用基因工程的方法构建、表达和纯化肝癌相关抗原SMP30,研究共表达分子伴侣提高基因工程蛋白表达的可溶性及效率。PCR扩增SMP30 cDNA序列,用基因工程技术构建重组表达质粒,转化E.coliBL21（DE3）pLysS宿主菌。表达蛋白经Ni-NTA亲和柱纯化获得HIS-SMP30融合蛋白;分别将4种表达不同分子伴侣的质粒（pG-KJE8、pGro7、pKJE7、pTf16）转入E.coliBL21（DE3）中;然后再将重组质粒转入含有分子伴侣质粒的细胞中,进行分子伴侣与重组质粒的共表达,SD