【摘 要】
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为研究抗癌方对抑癌基因的影响,并证实其抗癌疗效.采用人肝癌细胞HepG2培养,人肝癌细胞裸鼠移植及血清药理学方法,分析抗癌方对人肝癌细胞株HepG2的影响,用LSAB法分析P53,免
【机 构】
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湖南中医学院,中医诊断研究所,湖南,长沙410007;湛江师范学院,广东,湛江524000;湖南省卫生防疫站,湖南,长沙410000;深圳中医院,广东,深圳518000;湖南中医学院,第一附属医院,湖
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为研究抗癌方对抑癌基因的影响,并证实其抗癌疗效.采用人肝癌细胞HepG2培养,人肝癌细胞裸鼠移植及血清药理学方法,分析抗癌方对人肝癌细胞株HepG2的影响,用LSAB法分析P53,免疫组化法分析HepG2 P21waf1/Cip1蛋白表达;并对人肝癌细胞裸鼠复种移植瘤,用光镜、电镜观测其细胞形态学变化和P21蛋白基因表达.结果显示,抗癌方能明显抑制HepG2的生长,对HepG2细胞的半数生长的抑制剂量(IC 50)为1 mg/ml.LSAB方法观察发现抗癌方能诱导HepG2细胞株从相当弱到非常强的比较致密的细胞核染色,且低浓度(0.1 mg/ml)P53蛋白表达诱导作用强于高浓度(1 mg/ml),将近50%的细胞出现P53高表达,抗癌方血清各组人肝癌细胞HepG2 P21waf1/Cip1表达高于CTX组及空白血清组(均P＜0.01).大剂量组HepG2 P21waf1/Cip1表达高于中剂量组及小剂量组(均P＜0.05).CTX血清组和空白血清组HepG2 P21waf 1/Cip 1表达无显著性差异(P＞0.05).对人肝癌细胞裸鼠复种移植瘤治疗后抗癌方组和CTX组移植瘤体和重量分别小于空模组(均P＜0.01),抑癌率为33%.抗癌方组癌组织HepG2 P21蛋白表达增强,而空模组、CTX组HepG2 P21蛋白表达均极低.电镜观察:抗癌方组癌细胞完整,核染色质浓缩并边集,细胞器结构清晰.空模组癌细胞间紧密连接;CTX组癌细胞不完整,细胞器空泡化,其抑癌主要是癌细胞坏死;抗癌方组为诱导癌细胞凋亡.提示新制抗癌方确含抑制人肝癌细胞HepG2有效成分,并且此成分口服有效,其抑癌率与CTX相当,但无CTX那样明显降低外周白细胞的副作用.其抑制HepG2体内、外生长的机理与明显诱导肝癌细胞HepG2凋亡,明显提高P53、P21waf1/Cip1蛋白表达有关.
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