【摘 要】
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目的 评价腺病毒自身的致炎作用在以其为载体的基因治疗中,对小鼠急性肺损伤(ALI)治疗效果的影响及意义.方法 C57/B6雄性小鼠随机分为4组:(1)以腺病毒为载体的靶基因LacZ治疗
【机 构】
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上海交通大学附属儿童医院呼吸科,上海交通大学附属儿童医院急救中心,the Institute Of Environmental Medicine,Department of Pulmonary and
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目的 评价腺病毒自身的致炎作用在以其为载体的基因治疗中,对小鼠急性肺损伤(ALI)治疗效果的影响及意义.方法 C57/B6雄性小鼠随机分为4组:(1)以腺病毒为载体的靶基因LacZ治疗组(AdLacZ组):43只;(2)3个对照组:①O2吸入前组(Con组):26只;②O2吸人后组:TBS+磷酸盐缓冲液(PBS)治疗组(PBS组)36只;③无治疗对照组(无治疗组):33只.100%O2吸入诱导小鼠高氧性ALI动物模型;在100%O2吸入前48 h经鼻腔通道给予装载LaeZ DNA的腺病毒质粒感染小鼠,并观察小鼠的死亡率.B-半乳糖酶活性测定法用于确定转染的1acZ基因在肺脏的蛋白活性的表达水平;肺的干/湿重比、支气管-肺泡灌洗液内的蛋白浓度和细胞分类分析用于评价肺炎症反应的程度.结果 经鼻腔通路的以腺病毒为载体的基因治疗,可造成转染基因LacZ的蛋白表达活性在肺脏持续有效地高表达,而且其表达水平在O2吸人72 h后仍可维持为O:吸入前的2倍以上(3.688 U/mg v8 1.589 U/mg);该组小鼠对高氧吸入敏感性高于各对照组,50%的小鼠生存时间短于PBS组[(86±3)h vs(94±7)h];同时,该组小鼠的支气管-肺泡内炎症细胞的渗出在100%O2吸入48 h后明显高于各对照组,继续O2吸入24 h后明显下降约50%;肺干/湿重比和支气管-肺泡灌洗液内蛋白浓度无明显下降.结论 腺病毒自身的致炎作用对ALI基因治疗效果的影响是轻度和暂时的,但需在评价治疗效果时加以重视.
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