【摘 要】
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[背景]金黄色葡萄球菌作为一种条件致病菌,在临床感染中扮演着重要的角色,需要研究更多更有效的防治手段.[目的]分离金黄色葡萄球菌噬菌体,研究其生物学特性,从而为金黄色葡
【机 构】
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中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室 甘肃兰州 730046
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[背景]金黄色葡萄球菌作为一种条件致病菌,在临床感染中扮演着重要的角色,需要研究更多更有效的防治手段.[目的]分离金黄色葡萄球菌噬菌体,研究其生物学特性,从而为金黄色葡萄球菌的替代防治提供理论借鉴.[方法]以金黄色葡萄球菌D085为宿主从污水中分离得到一株噬菌体,命名为vB_SauS_SAP3,用PEG8000浓缩、氯化铯密度梯度离心获得高纯度的噬菌体,1％乙酸双氧铀染色噬菌体进行电镜观察.测定噬菌体宿主谱、最佳感染复数(Multiplicity of Infection,MOI)、一步生长曲线、热稳定性、pH值稳定性及有机溶剂对噬菌体活性的影响.平衡酚法获取噬菌体基因组,Illumina测序技术和SPAdes软件进行基因组测序分析.[结果]电镜下,噬菌体SAP3头部直径为60±5 nm,尾部长170±5 nm.噬菌体vB_SauS_SAP3还能裂解5株金黄色葡萄球菌和1株产色葡萄球菌,其最佳感染复数为0.1.噬菌体vB_SauS_SAP3潜伏期为20min,60min后进入平台期,裂解量约为210 PFU/cell;对45℃以下温度有一定耐受性,超过45℃开始急剧失活;能在中性pH值时保持稳定活性,酸性环境会使其急剧失活,对碱性环境有一定的抵抗力;对氯仿和异戊醇不耐受.其基因组分析结果表明:噬菌体基因组大小为41 950 bp,GC含量为35.42％,预测有65个开放阅读框(Open Reading Frame,ORF).进化分析表明,噬菌体vB_SauS_SAP3属于长尾科噬菌体,是一种新型的噬菌体.[结论]噬菌体vB_SauS_SAP3是一株窄谱的能够耐受一定温度和碱性环境的长尾科新型噬菌体,对其研究可为金黄色葡萄球菌噬菌体的研究提供理论材料.
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