黑曲霉葡萄糖淀粉酶Ⅰ基因的克隆及在酵母中的表达

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【摘要】

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采用RT-PCR技术,从黑曲霉的菌丝体RNA中扩增出葡萄糖淀粉酶GAI的结构基因,将其连接到pPIC9载体中,转入巴斯德毕赤酵母GS115中,获得12株Mut重组酵母;甲醇诱导目的蛋白分泌表达

【作者】

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郭德军柳增善

【机构】

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黑龙江八一农垦大学食品学院,吉林大学和平校区

【出处】

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生物技术

【发表日期】

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2005年5期

【关键词】

：

黑曲霉葡萄糖淀粉酶毕赤酵母 Aspergillus niger Ghcoamylase Ⅰ Pichia pastoris secretory ex

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采用RT-PCR技术,从黑曲霉的菌丝体RNA中扩增出葡萄糖淀粉酶GAI的结构基因,将其连接到pPIC9载体中,转入巴斯德毕赤酵母GS115中,获得12株Mut重组酵母;甲醇诱导目的蛋白分泌表达,葡萄糖淀粉酶酶活最高达180U/ml,占上清液蛋白的38%.通过GAI在巴斯德毕赤酵母中的表达,重点讨论了目的基因拷贝数,基因的偏爱性等对外源基因分泌表达的影响.

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