【摘 要】
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探究华重楼种胚休眠过程中miRNA 的表达模式,为miRNA调控种子休眠与萌发机制提供参考资料.利用高通量测序技术、生物信息学分析和实时荧光定量PCR(qPCR)技术,分别对处于休眠
【机 构】
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南京农业大学中药材研究所,江苏南京210095
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探究华重楼种胚休眠过程中miRNA 的表达模式,为miRNA调控种子休眠与萌发机制提供参考资料.利用高通量测序技术、生物信息学分析和实时荧光定量PCR(qPCR)技术,分别对处于休眠和休眠解除时期的华重楼种胚的miRNA进行高通量测序、筛选和鉴定.结果显示华重楼种胚休眠、休眠解除时期4个样本文库中分别有23 811 977,24 276 695,20 611 876,20 601 811 条unique序列.miRNA主要分布在21～24 nt,其中在休眠状态长度为24 nt 的miRNA数量最多,在休眠解除后的生长发育阶段19 nt 的最多.共鉴定出31 个已知的miRNA,属于13个不同的家族,并利用生物信息学软件预测到了 93个新的miRNA,比较分析休眠维持到休眠释放过程中差异表达的miRNA,筛选出10个差异表达的miRNA(miR156a-5p,miR160a-5p,miR160h-1,miR169a-5p,miR157d,miR159a-1,miR395-3,miR156f-5p,miR156-2,miR171a-3p).该研究共鉴定出 10个与华重楼种子休眠解除相关的miRNAs,GO与KEGG功能富集分析表明,差异表达的miRNA靶基因主要通过碳水化合物代谢、植物激素信号转导、细胞分裂和生长等途径调控种子休眠和萌发,qRT-PCR验证结果显示测序结果和实际结果一致.
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