HBV微环DNA重组质粒的构建及初步药效学实验

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目的构建HBV的治疗性微环质粒并进行体内外实验研究。方法采用聚合酶链式反应扩增HBV包膜蛋白pre S2.S抗原基因和h IL-2-IFNγ融合基因,将2个基因分别克隆于ZY781载体,得到亲本质粒pre S2.S/ZY781和h IL-2-IFNγ/ZY781,测序正确后,用阿拉伯糖诱导生成微环质粒p MCS2.S和p MCIIF。转染微环质粒于COS-7细胞株,用酶联免疫吸附法定量法检测24、48、72 h时目的蛋白的表达情况。双质粒联合在体电脉冲注射BALB/c小鼠,4周后处死小鼠,检测特异性的体液
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