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目的：建立pOct4-Neo转基因的小鼠胚胎干细胞（ESC）株，为进一步研究ESC分化提供有力的保障。方法：设置G418不同浓度进行小鼠ESC培养，确定ESC致死G418浓度；电穿孔法转染小鼠ESC，通过G418筛选并挑取阳性克隆，检测所得细胞胚胎干细胞特异性标志物Oct4及SSEA-1的表达，通过拟胚体诱导体外分化。结果：ESC的致死浓度为350μg/mL，在含400μg/mlG418的培养条件下，所得阳性细胞呈克隆样鸟巢状生长，Oct4、SSEA-1表达阳性，体外可以形成拟胚体和自发分化。结论：成功对