【摘 要】
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目的 观察小鼠胚胎心脏发育过程中转录因子胰岛素基因增强子结合蛋白1( Islet-1)的时序性表达规律,并探讨其与组蛋白乙酰化酶p300介导的组蛋白乙酰化调控网络中的关系.方法
【机 构】
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重庆医科大学附属儿童医院心血管内科与小儿心血管病学研究室,重庆400014重庆医科大学附属儿童医院儿童发育疾病研究省部共建教育部重点实验室,重庆市儿童发育重大疾病诊治与预防国际科技合作基地,重庆400
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目的 观察小鼠胚胎心脏发育过程中转录因子胰岛素基因增强子结合蛋白1( Islet-1)的时序性表达规律,并探讨其与组蛋白乙酰化酶p300介导的组蛋白乙酰化调控网络中的关系.方法 以健康6-8周龄昆明小鼠为研究对象,下午17:00雄雌按1∶2比例合笼,次日观察阴栓,观察到阴栓最早之日计为胎龄0.5 d(EO.5).取胎龄为E11.5、E14.5、E17.5的胎鼠和新生鼠的心脏,利用Western blot方法定量分析lslet-1的时序性表达规律,并利用蛋白质免疫共沉淀(Co-IP)和串联质谱分析方法(MS)鉴定Islet-1与组蛋白乙酰化酶p300的关系,同时应用Western blot方法反验证实验结果.结果 1.在小鼠胚胎心脏发育过程中,Islet-1在E14.5时的表达水平(0.434±0.353)明显高于与其在E11.5(0.074±0.456)、E17.5(0.120±0.127)和新生鼠(0.049±0.083)的表达水平,差异均有统计学意义(Pa<0.05),而其他时间点(E11.5、E17.5和新生鼠)间的表达差异无统计学意义(Pa>0.05).2.在胚胎心脏发育过程中,Islet-1与组蛋白乙酰化酶p300相互结合,以蛋白复合物的形式存在.结论 在小鼠胚胎心脏发育过程中,Islet-1可能作为枢纽因子,募集组蛋白乙酰化酶0300参与组蛋白乙酰化修饰调控.
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