【摘 要】
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目的 观察肿瘤坏死因子α(TNF-α)对体外培养人脐动脉血管平滑肌细胞(hUASMC)骨特异性碱性磷酸酶(BAP)、骨桥蛋白(OPN)和骨形成蛋白2(BMP-2)等成骨样分化标志蛋白表达以及细
【机 构】
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上海交通大学医学院附属仁济医院肾脏科
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目的 观察肿瘤坏死因子α(TNF-α)对体外培养人脐动脉血管平滑肌细胞(hUASMC)骨特异性碱性磷酸酶(BAP)、骨桥蛋白(OPN)和骨形成蛋白2(BMP-2)等成骨样分化标志蛋白表达以及细胞外钙盐沉积的影响.方法 植块贴壁法原代培养人hUASMC.予以TNF-α刺激,甲O-酚酞络合酮方法测定细胞外基质钙盐沉积;Von Kossa法观察钙化染色;实时定量PCR法测定血管平滑肌细胞BAP和OPN mRNA表达水平;免疫印迹法观察血管平滑肌细胞BAP、OPN和BMP-2蛋白表达水平. 结果一定浓度范围内的TNF-α可促进hUASMC增殖;增加细胞外基质钙盐沉积.TNF-α 50μg/L刺激可在第3天上调血管平滑肌细胞BAP和OPN mRNA表达水平(BAP mRNA:1.908±0.034比1.000±0.033,OPN mRNA:3.600±0.073比1.000±0.079,均P＜0.05)TNF-α 50μg/L刺激可在第5天上调血管平滑肌细胞BAP、OPN和BMP-2蛋白表达水平(BAP蛋白:3.394±0.083比1.000±0.030,OPN蛋白:1.967±0.134比1.000±0.070,BMP-2蛋白:2.745±0.289比1.000±0.208,均P＜0.05).结论 一定浓度范围的TNF-α可刺激hUASMC增殖;介导细胞成骨样分化;增加细胞外基质钙盐沉积,从而参与血管钙化的发生发展.
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