【摘 要】
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目的获得粉尘螨Ⅰ类变应原(Der f1)cDNA克隆及亚克隆,并进行测序.方法设计合成引物,从粉尘螨体内提取RNA,经逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)获得cDNA,PCR扩增目的片段经纯化回收
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目的获得粉尘螨Ⅰ类变应原(Der f1)cDNA克隆及亚克隆,并进行测序.方法设计合成引物,从粉尘螨体内提取RNA,经逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)获得cDNA,PCR扩增目的片段经纯化回收后克隆至pMD-18T,转化大肠埃希菌(E.coli)JM109,经PCR初筛挑选阳性克隆并测序,将PCR筛检阳性重组子及pET-32a(+)表达载体分别用BamH Ⅰ和Sac Ⅰ双酶切,连接转化至E.coli感受态细胞JM109中过夜培养,挑选菌落进行酶切鉴定.结果从粉尘螨基因组RNA中扩增出Der f1基因,获
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