【摘 要】
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目的:制备辅酶Ⅱ依赖性视黄醇脱氢/还原酶(NRDR)多克隆抗体.方法:应用大肠杆菌BL21-AI表达NRDR,制备NRDR包涵体,使用从SDS-PAGE凝胶中回收的重组NRDR作为免疫原,采用肩胛骨下注射
【机 构】
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中国医科大学卫生部细胞生物学重点实验室,汕头大学医学院分子生物学中心
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目的:制备辅酶Ⅱ依赖性视黄醇脱氢/还原酶(NRDR)多克隆抗体.方法:应用大肠杆菌BL21-AI表达NRDR,制备NRDR包涵体,使用从SDS-PAGE凝胶中回收的重组NRDR作为免疫原,采用肩胛骨下注射作为免疫途径免疫兔.斑点杂交测定抗血清效价,HiTrap Protein G柱纯化兔IgG,免疫印迹鉴定抗体特异性.结果:BL21-AI对NRDR进行了高效表达.回收的NRDR蛋白溶液的浓度为0.36mg/ml,回收率为48.5%.所有免疫的动物在第2次追加免疫之后都产生了高效价的抗血清,血清的效价是1:
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