玉米ZmbHLH161基因的克隆及功能研究

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bHLH转录因子是植物第二大转录因子家族,在调节植物生长发育、信号转导和逆境胁迫响应等方面发挥着重要的作用.为了研究玉米bHLH家族基因在逆境胁迫响应中的功能,本研究从玉米根组织中克隆了ZmbHLH161(AC:NC_AQK75074)基因.生物信息学分析表明:该基因包含3个外显子,cDNA全长1460 bp,编码序列全长1059 bp,编码352个氨基酸;在玉米基因组中以单拷贝形式存在,功能未知;ZmbHLH161蛋白分子量为37.1 kD,理论等电点为6.10,具有bHLH转录因子家族特有的保守结构域,但不具跨膜结构,无信号肽,为亲水性蛋白,蛋白二级结构无规则卷曲所占比例最大,为42.05%.玉米原生质体瞬时表达试验表明,ZmbHLH161定位在细胞核内.实时荧光定量PCR(qPCR)分析表明,正常生长条件下,ZmbHLH161主要在根系和幼胚中表达;在脱水和干旱处理下,ZmbHLH161在玉米苗期叶片中上调表达.转基因异源表达ZmbHLH161拟南芥株系经不同浓度NaCl处理后,其根长与野生型差异不显著,而不同浓度甘露醇处理后其根长优于野生型.由此推测ZmbHLH161基因可能参与玉米对渗透胁迫应答.
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